Bộ ForeDirect RT-qPCR
Sự miêu tả
ForeDirect RT-qPCR Kit được thiết kế để khuếch đại RNA trực tiếp theo thời gian thực từ bộ sưu tập tăm bông mà không cần quy trình tinh chế RNA.Bộ này hoàn thành các chu kỳ qRT-PCR trong vòng một giờ.Hỗn hợp enzyme là sự pha trộn tối ưu của Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, chất ức chế RNase.Bộ đệm phản ứng chứa tất cả các thành phần cần thiết, bao gồm các thành phần bộ đệm được tối ưu hóa, Mg2+, dUTP và dNTP.
thông số kỹ thuật
100T
thành phần bộ
Chất giải phóng axit nucleic |
chất bảo vệ ARN |
Bộ đệm 2× RT-qPCR |
Hỗn hợp Enzyme (Taq&M-MLV) |
Hướng dẫn |
ứng dụng PCR
1. Khi các ống phản ứng PCR đã được ly tâm trong thời gian ngắn, hãy đặt chúng vào bình chứa mẫu của dụng cụ khuếch đại.
2. Giao thức nhiệt
Bước chân | Nhiệt độ | Thời gian | chu kỳ | |
1 | Phiên mã ngược | 50℃ | 15 phút | 1 |
2 | tiền biến tính | 95℃ | 1 phút | 1 |
3 | biến tính | 95℃ | 10 giây | 42 |
4 | Ủ/Mở rộng | 60℃ | 30 giây |
Ghi chú:Tín hiệu huỳnh quang được phát hiện ngay sau bước mở rộng của mỗi chu kỳ.
3. Sau khi cài đặt, hãy lưu tệp và chạy chương trình phản ứng.
Các bước vận hành
Trước khi chuẩn bị thuốc thử, tất cả thuốc thử trong bộ phải được rã đông ở nhiệt độ phòng và trộn nhẹ nhàng.
chuẩn bị thuốc thử
1. Chuẩn bị hỗn hợp giải phóng axit nucleic
Thành phần | Khối lượng trên mỗi mẫu hoặc kiểm soát |
Chất giải phóng axit nucleic | 5μL |
chất bảo vệ ARN | 0,5 μl |
2. Chuẩn bị hỗn hợp phản ứng
Thành phần | Khối lượng trên mỗi mẫu hoặc kiểm soát |
Bộ đệm 2× RT-qPCR | 15 μL |
Hỗn hợp Enzyme (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
Mồi và thăm dò | 1μL |
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
-Bộ nên được bảo quản ở -20± 5℃.Thời hạn hiệu lực là 12 tháng.
-Tránh các chu kỳ đóng băng-rã đông lặp đi lặp lại (<5 chu kỳ).