• Facebook
  • linkin
  • youtube
English
trang_banner

Foreasy HS Taq DNA polymerase

Hình ảnh nổi bật của Foreasy HS Taq DNA Polymerase
  • Foreasy HS Taq DNA polymerase

Bộ mô tả:

◮Tính đặc hiệu cao: Enzyme có hoạt tính khởi động nóng cao.

◮Khuếch đại nhanh: 10 giây/kb.

◮Khả năng thích ứng mẫu cao : có thể được sử dụng để khuếch đại hiệu quả CaoGCgiá trịVàkhuôn mẫu DNA khó khuếch đại khác nhau.

◮Độ trung thực cao: Độ trung thực gấp 6 lầnof Enzyme Taq thông thường.

sức mạnh tiền thân


Chi tiết sản phẩm

Thẻ sản phẩm

Câu hỏi thường gặp

Sự miêu tả

Foreasy HS Taq DNA Polymerase là một enzym Taq mới được thể hiện ở vi khuẩn kỹ thuật Escherichia coli bằng công nghệ tái tổ hợp gen .Sau khi enzyme được xử lý bằng một quy trình đặc biệt, nó'Hoạt động của s bị ức chế trước khi kích hoạt nhiệt, do đó ức chế sự khuếch đại không đặc hiệu gây ra bởi quá trình ủ không đặc hiệu của mồi hoặc chất làm mờ mồi trong điều kiện nhiệt độ thấp.Sản phẩm này phù hợp với Phản ứng PCR đặc hiệu caoion, M bội x PCR , hàm lượng GC cao ( > 60 % ) ,vớicấu trúc thứ cấphoặc khácgen nền mạnh mẽicskhuếch đại và genom quy mô lớnicsphát hiện khuếch đạiEnzyme này có hoạt tính 5' → 3' DNA polymerase và 5' → 3' exonuclease, nhưng không có hoạt tính 3' → 5' exonuclease.

thành phần bộ

Thành phần IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL)  5000 U (1mL)  50 KU (10 mL)  500 KU (100 mL)
Bộ đệm phản ứng 2× Taq  25mL ×5  250mL ×5  500 mL × 25

Tính năng & ưu điểm

- Tính đặc hiệu cao: Enzim có hoạt tính khởi động cao.

- Khuếch đại nhanh: 10 giây/kb.

- Khả năng thích ứng mẫu cao : có thể được sử dụng để khuếch đại Cao một cách hiệu quảGCgiá trịVàkhuôn mẫu DNA khó khuếch đại khác nhau.

- Độ trung thực cao: Độ trung thực gấp 6 lầnof Enzyme Taq thông thường.

ứng dụng bộ

- Hệ thống PCR/qPCR đa dạng và hệ thống PCR trực tiếp

- Đoạn DNA khuếch đại PCR

- Dấu hiệu ADN

- Xét nghiệm DNA

- PCR cộng đuôi A

Định nghĩa hoạt động

1U : Lượng enzyme cần thiết để kết hợp 10nmol củaADNthành chất không tan trong axit bằng cách sử dụng DNA tinh trùng cá hồi đã hoạt hóa làm khuôn/mồi, 74°C, 30 phút.

Điều kiện phản ứng

Nhiệt độ Thời gian phản ứng Thời gian chu kỳ
37°C 5 phút 1
94°C 5 phút 1
94°C 10 giây  40
60°C 10 giây

Ghi chú:Đối với các hệ thống 10 µL và 20 µL, hãy thêm một lượng dầu khoáng tương đương nếu máy tuần hoàn nhiệt không có nắp nhiệt.

Các điều kiện phản ứng PCR khác nhau tùy thuộc vào điều kiện cấu trúc của mẫu, mồi và những thứ tương tự.Trong hoạt động cụ thể, cần thiết kế các điều kiện phản ứng tối ưu, bao gồm nhiệt độ ủ, thời gian kéo dài, v.v., theo các điều kiện cụ thể như loại mẫu, kích thước của đoạn mục tiêu, trình tự cơ sở của đoạn được khuếch đại, hàm lượng GC và độ dài của mồi.

Kho

-20 ± 5 °C trong 2 năm hoặc ở -80 °C để lưu trữ lâu dài.

  • Trước:
  • Kế tiếp:

    • Không có tín hiệu khuếch đại

    1.Taq DNA Polymerase trong bộ kit mất hoạt tính do bảo quản không đúng cách hoặc bộ kit hết hạn sử dụng.
    Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của bộ;thêm lại một lượng Taq DNA Polymerase thích hợp vào hệ thống PCR hoặc mua Bộ công cụ PCR thời gian thực mới cho các thí nghiệm liên quan.

    2. Có rất nhiều chất ức chế Taq DNA Polymerase trong khuôn mẫu DNA.
    Đề xuất: Tinh chỉnh lại mẫu hoặc giảm lượng mẫu được sử dụng.

    3.Nồng độ Mg2+ không phù hợp.
    Khuyến nghị: Nồng độ Mg2+ của 2× Real PCR Mix mà chúng tôi cung cấp là 3,5mM.Tuy nhiên, đối với một số primer và template đặc biệt, nồng độ Mg2+ có thể cao hơn.Do đó, bạn có thể thêm trực tiếp MgCl2 để tối ưu hóa nồng độ Mg2+.Nên tăng Mg2+ 0,5mM mỗi lần để tối ưu.

    4. Điều kiện khuếch đại PCR không phù hợp, trình tự mồi hoặc nồng độ không phù hợp.
    Gợi ý: khẳng định trình tự mồi đúng và mồi không bị suy thoái;nếu tín hiệu khuếch đại không tốt, cố gắng giảm nhiệt độ ủ và điều chỉnh nồng độ mồi thích hợp.

    5. Số lượng mẫu quá ít hoặc quá nhiều.
    Khuyến nghị: Thực hiện pha loãng gradient tuyến tính hóa mẫu và chọn nồng độ mẫu có hiệu ứng PCR tốt nhất cho thí nghiệm PCR thời gian thực.

    NTC có giá trị huỳnh quang quá cao

    1. Nhiễm bẩn thuốc thử gây ra trong quá trình vận hành.
    Khuyến nghị: Thay thế bằng thuốc thử mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    2. Sự nhiễm bẩn xảy ra trong quá trình chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR.
    Khuyến cáo: Thực hiện các biện pháp bảo vệ cần thiết trong quá trình thao tác như: đeo găng tay cao su, sử dụng đầu pipet có bộ lọc, v.v.

    3. Các đoạn mồi bị suy giảm và sự xuống cấp của các đoạn mồi sẽ gây ra sự khuếch đại không đặc hiệu.
    Đề xuất: Sử dụng điện di SDS-PAGE để phát hiện xem các đoạn mồi có bị phân hủy hay không và thay thế chúng bằng các đoạn mồi mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    Primer dimer hoặc khuếch đại không đặc hiệu

    1.Nồng độ Mg2+ không phù hợp.
    Khuyến nghị: Nồng độ Mg2+ của 2× Real PCR EasyTM Mix mà chúng tôi cung cấp là 3,5 mM.Tuy nhiên, đối với một số primer và template đặc biệt, nồng độ Mg2+ có thể cao hơn.Do đó, bạn có thể thêm trực tiếp MgCl2 để tối ưu hóa nồng độ Mg2+.Nên tăng Mg2+ 0,5mM mỗi lần để tối ưu.

    2. Nhiệt độ ủ PCR quá thấp.
    Gợi ý: Tăng nhiệt độ ủ PCR lên 1℃ hoặc 2℃ mỗi lần.

    3.Sản phẩm PCR quá dài.
    Khuyến nghị: Độ dài của sản phẩm Real Time PCR nên nằm trong khoảng 100-150bp, không quá 500bp.

    4. Các đoạn mồi bị suy giảm và sự xuống cấp của các đoạn mồi sẽ dẫn đến sự xuất hiện của sự khuếch đại cụ thể.
    Đề xuất: Sử dụng điện di SDS-PAGE để phát hiện xem các đoạn mồi có bị phân hủy hay không và thay thế chúng bằng các đoạn mồi mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    5. Hệ thống PCR không phù hợp hoặc hệ thống quá nhỏ.
    Gợi ý: Hệ thống phản ứng PCR quá nhỏ sẽ làm giảm độ chính xác phát hiện.Tốt nhất là sử dụng hệ thống phản ứng được đề xuất bởi công cụ PCR định lượng để chạy lại thí nghiệm Real Time PCR.

    Độ lặp lại kém của các giá trị định lượng

    1. Máy bị trục trặc.
    Gợi ý: Có thể có lỗi giữa mỗi lỗ PCR của thiết bị, dẫn đến khả năng tái tạo kém trong quá trình quản lý hoặc phát hiện nhiệt độ.Vui lòng kiểm tra theo hướng dẫn của thiết bị tương ứng.

    2. Độ tinh khiết của mẫu không tốt.
    Khuyến nghị: Các mẫu không tinh khiết sẽ dẫn đến khả năng tái tạo kém của thí nghiệm, bao gồm cả độ tinh khiết của mẫu và mồi.Tốt nhất là làm sạch lại mẫu và các mồi được làm sạch tốt nhất bằng SDS-PAGE.

    3. Thời gian chuẩn bị và lưu trữ hệ thống PCR quá dài.
    Gợi ý: Sử dụng hệ thống Real Time PCR cho thí nghiệm PCR ngay sau khi chuẩn bị và không để quá lâu.

    4. Điều kiện khuếch đại PCR không phù hợp, trình tự mồi hoặc nồng độ không phù hợp.
    Gợi ý: khẳng định trình tự mồi đúng và mồi không bị suy thoái;nếu tín hiệu khuếch đại không tốt, cố gắng giảm nhiệt độ ủ và điều chỉnh nồng độ mồi thích hợp.

    5. Hệ thống PCR không phù hợp hoặc hệ thống quá nhỏ.
    Gợi ý: Hệ thống phản ứng PCR quá nhỏ sẽ làm giảm độ chính xác phát hiện.Tốt nhất là sử dụng hệ thống phản ứng được đề xuất bởi công cụ PCR định lượng để chạy lại thí nghiệm Real Time PCR.

    Viết tin nhắn của bạn ở đây và gửi cho chúng tôi

    Có liên quanCác sản phẩm

    Nhấn enter để tìm kiếm hoặc ESC để đóng