Bộ RT-qPCR trực tiếp
Bộ mô tả:
◮ Direct RT-qPCR Kit, sử dụng Foreasy Reverse Transcriptase và Foreasy HS Taq DNA Polymerase do Foregene phát triển, với bộ đệm phản ứng độc đáo, làm cho bộ này có khả năng tương thích và kháng cự mạnh, đồng thời có thể kiểm tra phản ứng trực tiếp bằng cách sử dụng hệ thống Ly giải Foregene làm khuôn mẫu.Bộ này có thể áp dụng cho bộ phát hiện axit nucleic COVID-19 và phát triển bộ phát hiện axit nucleic của vi khuẩn gây bệnh khác.
Sự miêu tả
Direct RT-qPCR Kit cung cấp bộ đệm RT-qPCR được đóng gói riêng biệt và enzyme hiệu quả caohỗn hợp (Taq、M-MLV、RI), thuận tiện cho việc tạo các bộ công cụ và hệ thống phụ trợđiều chỉnh, trong vòng xác minh đơn giản.
thông số kỹ thuật
500T, 50.000T
thành phần bộ
| Nội dung lắp ráp (Hệ thống phản ứng 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 tấn | 50.000 tấn | |
| Hỗn hợp Enzyme trực tiếp | 500 μL×1 | 50mL×1 |
| Bộ đệm RT-qPCR trực tiếp 2× | 1mL×5 | 500mL×1 |
| Chỉ dẫn | 1 | 1 |
Các bước vận hành
Trước khi chuẩn bị thuốc thử, tất cả thuốc thử trong bộ phải được rã đông ở nhiệt độ phòng và trộn nhẹ nhàng.
A: Chuẩn bị of bản mẫu Và thuốc thử
1. Chuẩn bị mẫu RNA đã chuẩn bị sẵn (Khuyến nghị sử dụng bộ công cụ sê-ri Foregene Total RNA Isolation Kit để chiết xuất và tinh chế mẫu RNA) hoặc sản phẩm bẻ khóa mẫu (Khuyến nghị sử dụng hệ thống Foregene Lysis), mồi cụ thể (10 μM) và các vật tư tiêu hao, dụng cụ có liên quan khác.
2. Đặt 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O và 20× ROX Reference Dye (nếu'cần thiết) trong hộp có đá, làm cho chúng tan chảy tự nhiên và trộn nhẹ nhàng.
B: Chuẩn bị of RT-qPCR hệ thống
Bàn 1 : Chuẩn bị of RT-qPCR shệ thống
| Thành phần | Âm lượng | Nồng độ cuối cùng |
| Bộ đệm RT-qPCR trực tiếp 2× | 10 μL | 1× |
| Hỗn hợp Enzyme trực tiếp | 1μL | |
| Sơn lót chuyển tiếp (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Đảo ngược mồi (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Đầu dò (4 M) | 1μL | 200nM |
| Mẫu (RNA hoặc Lysate) | XµL | |
| Thuốc nhuộm tham chiếu ROX 20× | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X)μL | |
| Tổng khối lượng | 20μL |
C: Bộ các RT-qPCR sự phản ứng lại chương trình
Bàn 2 : RT-qPCR phản ứngon chương trình cài đặt (vì ví dụ: hai-bước chân phương pháp)
| Bước chân | Nhiệt độ | Thời gian | chu kỳ | Nội dung | |
| 1 | 50℃ | 15 phút | 1* | 1 | Phiên mã ngược |
| 2 | 95℃ | 1 phút | 1 | tiền biến tính | |
| 3 | 95℃ | 10 giây | 40-45 | biến tính | |
| 60℃ | 30 giây 2* | Ủ/Mở rộng | |||
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
-Bộ nên được bảo quản ở -20± 5℃.Thời hạn hiệu lực là 12 tháng.
-Tránh các chu kỳ đóng băng-rã đông lặp đi lặp lại (<5 chu kỳ).
