QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Bộ mô tả:
◮Hệ thống tối ưu hóa PCR độc đáo tạo ra 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman tương thích hơn.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase có hiệu quả khuếch đại cao hơn, độ nhạy khuếch đại cao hơn và độ đặc hiệu khuếch đại cao hơn.
◮2× Dễ dàng Nhanh chóngTMReal PCR Mix -Taqman sử dụng một hệ thống duy nhất được Foregene tối ưu hóa để cải thiện độ nhạy và độ đặc hiệu của phát hiện đầu dò theo trình tự cụ thể, có thể được sử dụng để xác định kiểu gen và sao chép biến thể số lượng và thu được kết quả chính xác.
◮Sản phẩm này đi kèm với thuốc nhuộm tham chiếu bên trong ROX, có thể được sử dụng để loại bỏ nền tín hiệu và lỗi tín hiệu giữa các giếng, thuận tiện cho khách hàng sử dụng trong các loại thiết bị PCR định lượng khác nhau.
mô tả
QuickEasy 2×TMReal PCR Mix-Taqman do QuickEasy cung cấpTMReal Time PCR Kit-Taqman kit là hệ thống master mix thế hệ mới được thiết kế cho phản ứng khuếch đại Real Time PCR sử dụng các đầu dò huỳnh quang cụ thể.Foregene HS Taq DNA Polymerase cốt lõi của nó dựa trên sửa đổi Kháng thể, được sử dụng cùng với hệ thống PCR được tối ưu hóa hơn nữa của Foregene, có độ đặc hiệu và hiệu quả khuếch đại cao hơn.So với hỗn hợp PCR thông thường, nó có khả năng khuếch đại mạnh hơn và tỷ lệ không phù hợp thấp hơn.Nó có thể được sử dụng trong phản ứng PCR định lượng huỳnh quang để giảm sự khuếch đại không đặc hiệu và cải thiện độ chính xác của PCR.Nó có thể cải thiện đáng kể độ đặc hiệu của sản phẩm và độ nhạy phản ứng.Đồng thời, ROX được cung cấp dưới dạng thuốc nhuộm tham chiếu nội bộ.
Nhanh ChóngTMBộ Kit-Taqman PCR thời gian thực có phạm vi ứng dụng rộng đối với số lượng mẫu và có thể thu được đường cong chuẩn tốt ở các vùng định lượng khác nhau, đồng thời có thể định lượng và phát hiện chính xác các gen mục tiêu với độ lặp lại tốt và độ tin cậy cao.
thông số kỹ thuật
200 dự bị,500 dự bị,1000 dự bị,Dự bị năm 2000
thành phần bộ
| nhanh chóng dễ dàngTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlhệ thống) | ||||
| Nội dung lắp ráp | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 bài chuẩn bị | 500 bài chuẩn bị | 1000 bài chuẩn bị | Dự bị năm 2000 | |
| 2×NhanhDễTM PCR thực Pha trộn-Taqman | 1mL×2 | 1,7mL×3 | 1,7mL×6 | 1,7mL×12 |
| 20×Thuốc nhuộm tham chiếu ROX | 200μL | 0,5mL | 1mL | 1mL×2 |
| ddH không có DNase2O | 1,7mL | 1,7mL×2 | 10mL | 20mL |
| NẾU BẠN | 1cái | 1cái | 1cái | 1cái |
Tính năng & ưu điểm
■ Hệ thống tối ưu hóa PCR độc đáo giúp 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman tương thích hơn.
■ Khởi động nóng Foregene HS Taq Polymerase có hiệu quả khuếch đại cao hơn, độ nhạy khuếch đại cao hơn và độ đặc hiệu khuếch đại cao hơn.
■ 2× nhanh chóng dễ dàngTM Real PCR Mix -Taqman sử dụng một hệ thống duy nhất được Foregene tối ưu hóa để cải thiện độ nhạy và độ đặc hiệu của phát hiện đầu dò theo trình tự cụ thể, có thể được sử dụng để xác định kiểu gen và sao chép biến thể số lượng và thu được kết quả chính xác.
■ Sản phẩm này đi kèm với thuốc nhuộm tham chiếu bên trong ROX, có thể được sử dụng để loại bỏ nền tín hiệu và lỗi tín hiệu giữa các giếng, thuận tiện cho khách hàng sử dụng trong các loại thiết bị PCR định lượng khác nhau.
ứng dụng bộ
■ PCR định lượng huỳnh quang để phân tích định lượng tiêu bản;
■Ckhuếch đại PCR thông thường;
■ Có thể được sử dụng để phát hiện alen.
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
Bộ dụng cụ nên được bảo quản ở -20°C trong bóng tối;nếu dùng thường xuyên cũng có thể bảo quản ở nhiệt độ 4°C trong thời gian ngắn (dùng hết trong vòng 10 ngày).
Nguyên tắc thiết kế mồi Real Time PCR
Sơn lót xuôi và sơn lót ngược
Đối với Real Time PCR, thiết kế mồi rất quan trọng.Các đoạn mồi liên quan đến tính đặc hiệu và hiệu quả của quá trình khuếch đại PCR và có thể được thiết kế dựa trên các nguyên tắc sau:
Chiều dài mồi: 18-30bp.
hàm lượng GC: 40-60%.
Giá trị Tm: Phần mềm thiết kế mồi, chẳng hạn như Primer 5, có thể đưa ra giá trị Tm của mồi.Các giá trị Tm của đoạn mồi ngược dòng và xuôi dòng phải càng gần càng tốt.Công thức tính Tm cũng có thể được sử dụng: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Khi thực hiện PCR, nhiệt độ dưới giá trị Tm mồi là 5 °C thường được chọn làm nhiệt độ ủ (sự gia tăng tương ứng của nhiệt độ ủ có thể làm tăng tính đặc hiệu của phản ứng PCR).
Mồi và sản phẩm PCR:
Độ dài sản phẩm khuếch đại PCR mồi thiết kế tốt nhất là 100-150bp.
Nên tránh sơn lót thiết kế trong khu vực cấu trúc thứ cấp của mẫu càng nhiều càng tốt.
Tránh hình thành 2 hoặc nhiều bazơ bổ sung giữa 3′ đầu của mồi ngược dòng và xuôi dòng.
Không thể xuất hiện đế đầu cuối của mồi 3′ với 3 G hoặc C liên tiếp bổ sung.
Bản thân mồi không thể có cấu trúc bổ sung, nếu không cấu trúc kẹp tóc sẽ được hình thành, ảnh hưởng đến quá trình khuếch đại PCR.
ATCG nên được phân phối càng đồng đều càng tốt trong trình tự mồi và nên tránh cơ sở đầu cuối 3′ là T.
Phụ lục 1：Gói bổ sung thành phần Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Dung dịch ly giải tế bào
|
| |||
| thành phần bộ (Hệ thống ly giải 24 giếng/giếng) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100T | 500 tấn | ||
| PhầnTÔI | đệm CL | 20ml | 100ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1ml × 2 | |
| đệm ST | 1ml × 2 | 10ml | |
| PhầnII | tẩy DNA | 400 μl | 1ml × 2 |
2.RT Trộn
|
| |
| thành phần bộ (hệ thống phản ứng 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200 tấn | |
| Kết hợp RT trực tiếp 5× | 800 μl |
| ddH không có RNase2O | 1,7ml × 2 |
|
| ||
| thành phần bộ (hệ thống phản ứng 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 tấn | 1000 tấn | |
| 2× Kết hợp qPCR trực tiếp-SYBR | 1ml × 2 | 1,7ml × 6 |
| Thuốc nhuộm tham chiếu ROX 50× | 40 μl | 200 μl |
| ddH không có RNase2O | 1,7ml | 10ml |
