Buccal Swab/Bộ cách ly DNA thẻ FTA Bộ trích xuất hoặc tinh chế DNA bộ gen từ Buccal Swabs
Bộ mô tả:
Nhanh chóng tinh sạch DNA bộ gen chất lượng cao từ các mẫu tăm bông/Thẻ FTA.
◮Không nhiễm RNase:Cột Chỉ dành cho DNA do bộ công cụ cung cấp cho phép loại bỏ RNA khỏi DNA bộ gen mà không cần thêm RNase trong quá trình thí nghiệm, giúp phòng thí nghiệm không bị nhiễm RNase ngoại sinh.
◮Tốc độ nhanh:Foregene Protease có hoạt tính cao hơn các protease tương tự và tiêu hóa các mẫu mô nhanh chóng;thao tác này rất đơn giản và thao tác trích xuất DNA bộ gen có thể được hoàn thành trong vòng 20-80 phút.
◮Thuận lợi:Quá trình ly tâm được thực hiện ở nhiệt độ phòng và không cần ly tâm ở nhiệt độ thấp 4°C hoặc kết tủa DNA trong ethanol.
◮Sự an toàn:Không cần chiết xuất thuốc thử hữu cơ.
◮Chất lượng cao:DNA bộ gen được chiết xuất có các đoạn lớn, không có RNA, không có RNase và hàm lượng ion cực thấp, có thể đáp ứng các yêu cầu của các thí nghiệm khác nhau.
◮Hệ thống rửa giải vi mô:Nó có thể làm tăng nồng độ DNA bộ gen, thuận tiện cho việc phát hiện hoặc thử nghiệm xuôi dòng.
Sự miêu tả
Bộ dụng cụ này cung cấp một phương pháp hiệu quả và nhanh chóng để thu được DNA bộ gen có nồng độ cao từ tăm bông và Thẻ FTA (đốm máu).Sử dụng công ty chúng tôi'Công thức và cột kéo sợi màng silica duy nhất của DNA, kết hợp với Foregene Protease, có thể chiết xuất DNA bộ gen chất lượng cao, nồng độ cao trong 80 phút.Cột tinh chế nhỏ được thiết kế đặc biệt liên kết DNA bộ gen và DNA có thể được rửa giải với một lượng nhỏ (15μl) để tăng nồng độ của DNA bộ gen thu được, thuận tiện cho việc phát hiện hoặc thử nghiệm xuôi dòng.Bộ này có thể xử lý một hoặc nhiều mẫu cùng một lúc và quá trình tinh chế không yêu cầu chiết xuất các chất hữu cơ như phenol, chloroform và kết tủa isopropanol hoặc ethanol tốn thời gian, thao tác đơn giản và tiết kiệm thời gian.
thông số kỹ thuật
50 bài chuẩn bị
thành phần bộ
| đệm ST1 |
| đệm ST2 |
| Acrylamit tuyến tính |
| Bộ đệm PW |
| bộ đệm WB |
| đệm EB |
| Protease tiền thân |
| Cột chỉ DNA |
| Hướng dẫn |
Tính năng & ưu điểm
-Không nhiễm RNase: Cột chỉ DNA được cung cấp bởi bộ kit giúp loại bỏ RNA khỏi DNA bộ gen mà không cần thêm RNase trong quá trình thí nghiệm, tránh cho phòng thí nghiệm bị nhiễm RNase ngoại sinh.
-Tốc độ nhanh: Protease Foregene có hoạt tính cao hơn các protease cùng loại, tiêu hóa mẫu nhanh;Hoạt động đơn giản.
-Thuận tiện: Quá trình ly tâm được thực hiện ở nhiệt độ phòng và không cần ly tâm ở nhiệt độ thấp 4°C hoặc kết tủa DNA bằng ethanol.
-An toàn: Không cần chiết xuất thuốc thử hữu cơ.
-Chất lượng cao: DNA bộ gen được chiết xuất có các đoạn lớn, không có RNA, không có RNase và hàm lượng ion cực thấp, có thể đáp ứng các yêu cầu của nhiều thí nghiệm khác nhau.
-Hệ thống rửa giải vi mô: Nó có thể làm tăng nồng độ DNA bộ gen, thuận tiện cho việc phát hiện hoặc thí nghiệm xuôi dòng.
ứng dụng bộ
Nó phù hợp để tinh chế DNA bộ gen từ các mẫu sau: miếng gạc ngoài má, Thẻ FTA (vết máu).
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
-Bộ kit này có thể được bảo quản trong 12 tháng trong điều kiện khô ráo ở nhiệt độ phòng (15-25°C);nếu cần bảo quản trong thời gian dài hơn, có thể bảo quản ở 2-8°C.
Lưu ý: Nếu bảo quản ở nhiệt độ thấp dung dịch dễ bị kết tủa.Trước khi sử dụng, hãy nhớ đặt dung dịch trong bộ dụng cụ ở nhiệt độ phòng trong một khoảng thời gian.Nếu cần, làm nóng trước trong bể nước 37°C trong 10 phút để hòa tan kết tủa và trộn trước khi sử dụng.
-Dung dịch Foregene Protease có công thức độc đáo, có hoạt tính khi bảo quản ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài (3 tháng);Hoạt tính và độ ổn định của nó sẽ tốt hơn khi bảo quản ở 4°C, vì vậy nên bảo quản ở 4°C, nhớ không để ở -20°C.
Cột thanh lọc bị tắc
Trong bộ này, trong hoạt động chiết xuất DNA bộ gen, cột tinh chế được hấp phụ trực tiếp trên hỗn hợp phân giải enzyme mẫu mà không cần bước ly tâm và cột tinh chế có thể bị chặn do quá trình enzyme hóa không hoàn toàn và độ nhớt cao của mẫu.
Các nguyên nhân có thể sau đây là như sau:
1. Quá trình tiêu hóa mẫu mô không hoàn toàn bằng enzym.
Khuyến nghị: Thời gian xử lý mẫu của Foregene Protease có thể được kéo dài một cách thích hợp hoặc có thể lấy phần nổi phía trên sau khi ly tâm ở 12.000 vòng/phút (~13.400 × g) trong 5 phút.
2. Sử dụng quá nhiều mẫu mô hoặc mô lớn.
Khuyến nghị: Tốt nhất là không nên lấy quá 1 tăm bông Buccal trong mẫu;nếu mẫu quá lớn thì tăng liều lượng Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 cho phù hợp.
3. Độ nhớt của mẫu quá cao.
Khuyến nghị: Các mẫu có thể được pha loãng thích hợp với 10 mM Tris-HCl trước khi chiết xuất DNA bộ gen.
4. Các mảnh thẻ máu đã bị hút.
Khuyến nghị: Thời gian ly tâm tạm thời của bước 6 của quá trình trích xuất bộ gen của vết máu (Thẻ FTA) có thể được kéo dài một cách thích hợp.
Năng suất thấp hoặc không có DNA
Thường có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến sản lượng DNA bộ gen, bao gồm nguồn gốc mẫu, điều kiện bảo quản mẫu, chuẩn bị mẫu, thao tác, v.v.
DNA bộ gen không thể thu được trong quá trình chiết xuất
Các nguyên nhân có thể như sau:
1. Bảo quản mẫu không đúng cách hoặc bảo quản quá lâu dẫn đến DNA bộ gen bị phân hủy.
Khuyến nghị: Tốt nhất nên lấy mẫu gạc trong miệng mới và không nên sử dụng gạc được bảo quản cho các hoạt động chiết xuất DNA bộ gen;mẫu vết máu phải đảm bảo chất lượng đạt tiêu chuẩn và thời gian bảo quản không quá lâu.
2. Việc sử dụng quá ít mô có thể dẫn đến không trích xuất được DNA bộ gen tương ứng.
Khuyến nghị: Thực hiện theo các hướng dẫn lấy mẫu tăm bông trong hướng dẫn vận hành và lau càng nhiều lần càng tốt để có thể gắn đủ tế bào vào tăm bông miệng để chiết xuất DNA bộ gen;để chiết xuất mẫu vết máu, diện tích cắt vết máu có thể được tăng lên một cách thích hợp.
3. Foregene Protease được bảo quản không đúng cách dẫn đến giảm hoạt tính hoặc mất hoạt tính.
Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của Foregene Protease hoặc thay thế bằng một Foregene Protease mới cho phản ứng enzym.
4. Bảo quản kit không đúng cách hoặc thời gian bảo quản quá lâu dẫn đến một số linh kiện trong kit bị hỏng.
Khuyến nghị: Mua bộ dụng cụ phân lập DNA tăm bông Buccal mới cho các quy trình liên quan.
5. Đệm WB không thêm ethanol tuyệt đối.
Khuyến nghị: Xác nhận rằng dung dịch đệm WB bổ sung đúng thể tích etanol tuyệt đối.
6. Dung dịch rửa giải không được thêm vào màng silicon một cách chính xác.
Khuyến nghị: Thêm các giọt dung dịch rửa giải được làm ấm trước ở 65°C vào giữa màng silicon và để ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để tăng hiệu quả rửa giải.
Phân lập DNA bộ gen năng suất thấp
Các nguyên nhân có thể sau đây là như sau:
1. Bảo quản mẫu không đúng cách hoặc bảo quản quá lâu dẫn đến DNA bộ gen bị phân hủy.
Khuyến nghị: Tốt nhất là nên lấy mẫu mới từ miếng gạc trong miệng và không nên sử dụng miếng gạc được bảo quản để chiết xuất DNA bộ gen.
2. Nếu lượng mẫu mô quá nhỏ, hàm lượng DNA bộ gen được chiết xuất sẽ ít hơn.
Khuyến nghị: Làm theo hướng dẫn lấy mẫu tăm bông miệng trong hướng dẫn vận hành, lau càng nhiều lần càng tốt để có thể có đủ tế bào dính vào tăm bông miệng để chiết xuất DNA bộ gen.
3. Foregene Protease được bảo quản không đúng cách dẫn đến giảm hoạt tính hoặc mất hoạt tính.
Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của Foregene Protease hoặc thay thế bằng một Foregene Protease mới cho phản ứng enzym.
4. Vấn đề rửa giải.
Khuyến nghị: Sử dụng đệm EB để rửa giải;nếu dùng ddH2O hoặc chất rửa giải khác, hãy xác nhận rằng độ pH của chất rửa giải nằm trong khoảng 7,0-8,5.
5. Dịch rửa giải không được thêm từng giọt một cách chính xác.
Khuyến nghị: Thêm các giọt dung dịch rửa giải vào giữa màng silicon và để ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để tăng hiệu quả rửa giải.
6. Chất lỏng rửa giải tích tụ quá ít.
Khuyến nghị: Sử dụng dung dịch rửa giải để rửa giải DNA bộ gen theo yêu cầu trong hướng dẫn, ít nhất không dưới 15 μl.
Độ tinh khiết thấp của DNA bộ gen được phân lập
Độ tinh khiết DNA bộ gen thấp có thể dẫn đến thất bại hoặc kết quả không đạt yêu cầu của các thí nghiệm tiếp theo, chẳng hạn như: không thể cắt mở enzyme, PCR không thể lấy được đoạn gen quan tâm, v.v.
Các nguyên nhân có thể như sau:
1. Ô nhiễm dị thể, ô nhiễm RNA.
Phân tích: Cột tinh chế không được rửa bằng Buffer PW;cột làm sạch Buffer PW wash không được rửa bằng tốc độ ly tâm chính xác.
Khuyến nghị: Đảm bảo rằng không có kết tủa ở phần nổi phía trên trước khi thêm etanol;đảm bảo rửa cột tinh chế theo hướng dẫn và không thể bỏ qua bước này.
2. Ô nhiễm ion tạp chất.
Phân tích: Cột lọc rửa Buffer WB bị bỏ qua hoặc chỉ được rửa một lần, dẫn đến ô nhiễm ion còn lại.
Khuyến nghị: Đảm bảo rửa Buffer WB 2 lần theo chỉ dẫn để loại bỏ các ion dư càng nhiều càng tốt.
3. Nhiễm enzym RNA.
Phân tích: RNase nước ngoài đã được thêm vào bộ đệm;Hoạt động rửa PW của bộ đệm không chính xác, dẫn đến dư lượng RNase, ảnh hưởng đến các hoạt động thử nghiệm RNA xuôi dòng, chẳng hạn như phiên mã trong ống nghiệm.
Khuyến nghị: Bộ dụng cụ phân lập axit nucleic sê-ri Foregene có thể loại bỏ RNA mà không cần bổ sung thêm RNase, do đó Bộ dụng cụ cách ly DNA của Swab Swab/Thẻ FTA không cần thêm RNase;đảm bảo làm theo hướng dẫn cho cột tinh chế rửa Buffer PW và không thể bỏ qua bước này.
4. Cặn etanol.
Phân tích: Bộ đệm WB không thực hiện ly tâm ống rỗng sau khi rửa cột tinh chế.
Khuyến cáo: Thực hiện đúng thao tác ly tâm ống rỗng theo hướng dẫn.
5. Ô nhiễm tạp chất khác.
Phân tích: Mẫu đã lưu hoặc mẫu đặc biệt không được xử lý trước.
Khuyến nghị: Xử lý kỹ mẫu trước như hướng dẫn.
