Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Với gDNase)(Super Premix để tổng hợp cDNA chuỗi đầu tiên từ lncRNA)
thông số kỹ thuật
25×20μtôi Rxns, 50×20μtôi Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Với gDNase) là một hệ thống phiên mã ngược được phát triển đặc biệt cho lncRNA để nhanh chóng loại bỏ nhiễm DNA bộ gen.5×gDNase Mix có thể nhanh chóng loại bỏ bộ gen còn lại trong RNA ở 42°C trong 2 phút, tránh được sự can thiệp của bộ gen đối với kết quả qPCR một cách hiệu quả.
Hỗn hợp 5×L-RT HeroTM chứa Foregene LncRNA Reverse Transcriptase do Foregene phát triển đặc biệt, đây là một loại enzyme phiên mã ngược mới dành riêng cho lncRNA và các mẫu phức hợp RNA dài khác, với ái lực RNA mạnh hơn và hiệu quả ghi đảo ngược cao hơn.Hệ thống được tối ưu hóa giúp tốc độ phiên mã ngược nhanh hơn và có thể dễ dàng phiên mã các mẫu RNA có hàm lượng GC cao và cấu trúc thứ cấp phức tạp.Quá trình tổng hợp cDNA sợi đầu tiên có thể được hoàn thành ở 42°C trong 15 phút.
thành phần bộ
| 5× hỗn hợp gDNase |
| 5× Hỗn hợp L-RT HeroTM |
| ddH2O không chứa RNase |
| Hướng dẫn |
Tính năng & ưu điểm
■Khả năng loại bỏ gDNA hiệu quả, có thể loại bỏ gDNA trong mẫu trong vòng 2 phút.
■ Nó có thể phiên mã ngược lncRNA một cách hiệu quả.Khi sản phẩm phiên mã ngược được xử lý bằng qPCR, giá trị Ct thấp hơn so với hệ thống phiên mã ngược thông thường.
■ Hệ thống phiên mã ngược hiệu quả, chỉ mất 15 phút để hoàn thành quá trình tổng hợp chuỗi cDNA đầu tiên.
■ Các mẫu phức tạp: các mẫu có hàm lượng GC cao và cấu trúc thứ cấp phức tạp cũng có thể được đảo ngược với hiệu quả cao.
■ Hệ thống phiên mã ngược có độ nhạy cao, mẫu cấp pg cũng có thể thu được cDNA chất lượng cao.
■ Hệ phiên mã ngược có độ bền nhiệt cao, nhiệt độ phản ứng tối ưu là 42℃, và nó vẫn có hiệu suất phiên mã ngược tốt ở 50℃.
ứng dụng bộ
lncRNA phân tích định lượng tương đối.
phân tích định lượng tuyệt đối lncRNA.
Nó có thể phân tích nhanh chóng và chính xác RNA dấu vết như virus RNA.
Phiên mã ngược các mẫu RNA có hàm lượng GC cao hoặc cấu trúc thứ cấp phức tạp.
quy trình làm việc
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
Bộ nên được lưu trữ ở -20°C. Bảo quản sản phẩm trong tủ lạnh có nhiệt độ ổn định ở -20°C ngay sau khi nhận hàng.Nếu các điều kiện bảo quản phù hợp, sản phẩm sẽ không suy giảm bất kỳ hiệu suất nào trong thời hạn hiệu lực 1 năm.
Hướng dẫn phân tích vấn đề
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-khuếch đại cụ thể
1. Thiết kế sơn lót không hợp lý
Khuyến nghị: Thiết kế mồi theo nguyên tắc thiết kế mồi.
2. Dư lượng bộ gen.
Gợi ý: Đảm bảo rằng bước đầu tiên của nhiệt độ phản ứng loại bỏ gDNA là 42°C và thời gian phản ứng cũng có thể kéo dài đến 5 phút.
Không có tín hiệu khuếch đại bởi RT-qPCR
1. ARN bị thoái hóa.
Khuyến nghị: Nguyên liệu chiết xuất RNA phải càng mới càng tốt và nên sử dụng RNA có chất lượng cao và độ tinh khiết cao.
2. ARN chứa chất ức chế.
Khuyến nghị: Các chất ức chế phiên mã ngược thường bao gồm SDS, muối guanidine, EDTA, v.v. Nên rửa kết tủa RNA bằng ethanol 70% để loại bỏ các chất ức chế.
3. Vấn đề thiết kế mồi.
Khuyến nghị: Theo nguyên tắc thiết kế mồi, thiết kế lại mồi để kiểm tra.
Dải mục tiêu xuất hiện trong điều khiển trống
1. Nhiễm bẩn dụng cụ vận hành hoặc thuốc thử.
Khuyến nghị: Tất cả các thuốc thử hoặc thiết bị cho thí nghiệm nên được hấp khử trùng.Cẩn thận và nhẹ nhàng khi thao tác để tránh mẫu DNA bị hút vào pipet hoặc tràn ra ngoài ống ly tâm.
2. Sự nhiễm bẩn xảy ra trong quá trình chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR.
Khuyến nghị: Thực hiện các biện pháp phòng ngừa cần thiết khi xử lý, chẳng hạn như: đeo găng tay cao su, sử dụng đầu lọc.Sử dụng Real Time PCR Mix trong một hệ thống chống nhiễm bẩn.
3. Các primer bị thoái hóa.
Đề xuất: Sử dụng điện di SDS-PAGE để phát hiện xem các đoạn mồi có bị xuống cấp hay không và thay thế bằng các đoạn mồi mới cho các thí nghiệm phát hiện huỳnh quang.
Cẩm nang hướng dẫn:
