• Facebook
  • linkin
  • youtube
English
trang_banner

Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman Hình ảnh nổi bật
  • Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman
  • Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Bộ mô tả:

◮Đơn giản—2× PCR Mix để giảm lỗi thí nghiệm và thời gian vận hành

◮Bộ đệm cụ thể—được tối ưu hóa và enzyme Taq khởi động nóng có thể ngăn chặn sự khuếch đại không đặc hiệu và sự hình thành dimer mồi

◮Độ nhạy cao—có thể phát hiện các bản sao thấp của mẫu

◮Tính linh hoạt tốt—tương thích với hầu hết các thiết bị PCR định lượng thời gian thực

sức mạnh tiền thân


Chi tiết sản phẩm

Thẻ sản phẩm

Câu hỏi thường gặp

Mô tả bộ

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman do Real Time PCR Easy cung cấpTM-Taqman kit là một hệ thống trộn sẵn mới sử dụng các đầu dò huỳnh quang cụ thể cho các phản ứng khuếch đại PCR thời gian thực, có thể cải thiện đáng kể độ đặc hiệu của sản phẩm và độ nhạy của phản ứng.ROX được cung cấp dưới dạng thuốc nhuộm kiểm soát nội bộ.

2X Real PCR dễ dàngTMMix-Taqman chứa Taq DNA Polymerase khởi động nóng độc đáo của Foregene.So với các enzyme Taq thông thường, nó có ưu điểm là hiệu quả khuếch đại cao, khả năng khuếch đại đặc hiệu mạnh và tỷ lệ không khớp thấp.Nó có thể làm giảm sự khuếch đại không đặc hiệu và cải thiện độ chính xác của PCR.

thông số kỹ thuật

PCR thời gian thực dễ dàngTM-Taqman

Thành phần kit (hệ thống 20μl)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

2×PCR thựcDễTMPha trộn-Taqman

1ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×Thuốc nhuộm tham chiếu ROX

200 μl

0,5ml

1ml

1ml × 2

ddH không có DNase2O

1,7ml

1.7 ml ×2

10ml

20ml

Ihướng dẫn

1

1

1

1

Tính năng & ưu điểm

■ Đơn giản—2X PCR Mix để giảm lỗi thí nghiệm và thời gian vận hành

■ Đặc hiệu—bộ đệm được tối ưu hóa và enzyme Taq khởi động nóng có thể ngăn chặn sự khuếch đại không đặc hiệu và sự hình thành dime mồi

■ Độ nhạy cao—có thể phát hiện các bản sao thấp của mẫu

■ Tính linh hoạt cao—tương thích với hầu hết các thiết bị PCR định lượng thời gian thực

ứng dụng bộ

phân tích qPCR

quy trình làm việc

RT PCR-Taqman
Hình ảnh RT PCR-Taqman

Đồ họa

Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bộ này nên được bảo quản tránh ánh sáng và nên được bảo quản ở -20℃.Nếu được sử dụng thường xuyên, nó cũng có thể được bảo quản ở 4℃ trong thời gian ngắn (10 ngày).

  • Trước:
  • Kế tiếp:

    • Không có tín hiệu khuếch đại

    1.Taq DNA Polymerase trong bộ kit mất hoạt tính do bảo quản không đúng cách hoặc bộ kit hết hạn sử dụng.
    Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của bộ;thêm lại một lượng Taq DNA Polymerase thích hợp vào hệ thống PCR hoặc mua Bộ công cụ PCR thời gian thực mới cho các thí nghiệm liên quan.

    2. Có rất nhiều chất ức chế Taq DNA Polymerase trong khuôn mẫu DNA.
    Đề xuất: Tinh chỉnh lại mẫu hoặc giảm lượng mẫu được sử dụng.

    3.Nồng độ Mg2+ không phù hợp.
    Khuyến nghị: Nồng độ Mg2+ của 2× Real PCR Mix mà chúng tôi cung cấp là 3,5mM.Tuy nhiên, đối với một số primer và template đặc biệt, nồng độ Mg2+ có thể cao hơn.Do đó, bạn có thể thêm trực tiếp MgCl2 để tối ưu hóa nồng độ Mg2+.Nên tăng Mg2+ 0,5mM mỗi lần để tối ưu.

    4. Điều kiện khuếch đại PCR không phù hợp, trình tự mồi hoặc nồng độ không phù hợp.
    Gợi ý: khẳng định trình tự mồi đúng và mồi không bị suy thoái;nếu tín hiệu khuếch đại không tốt, cố gắng giảm nhiệt độ ủ và điều chỉnh nồng độ mồi thích hợp.

    5. Số lượng mẫu quá ít hoặc quá nhiều.
    Khuyến nghị: Thực hiện pha loãng gradient tuyến tính hóa mẫu và chọn nồng độ mẫu có hiệu ứng PCR tốt nhất cho thí nghiệm PCR thời gian thực.

    NTC có giá trị huỳnh quang quá cao

    1. Nhiễm bẩn thuốc thử gây ra trong quá trình vận hành.
    Khuyến nghị: Thay thế bằng thuốc thử mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    2. Sự nhiễm bẩn xảy ra trong quá trình chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR.
    Khuyến cáo: Thực hiện các biện pháp bảo vệ cần thiết trong quá trình thao tác như: đeo găng tay cao su, sử dụng đầu pipet có bộ lọc, v.v.

    3. Các đoạn mồi bị suy giảm và sự xuống cấp của các đoạn mồi sẽ gây ra sự khuếch đại không đặc hiệu.
    Đề xuất: Sử dụng điện di SDS-PAGE để phát hiện xem các đoạn mồi có bị phân hủy hay không và thay thế chúng bằng các đoạn mồi mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    Primer dimer hoặc khuếch đại không đặc hiệu

    1.Nồng độ Mg2+ không phù hợp.
    Khuyến nghị: Nồng độ Mg2+ của 2× Real PCR EasyTM Mix mà chúng tôi cung cấp là 3,5 mM.Tuy nhiên, đối với một số primer và template đặc biệt, nồng độ Mg2+ có thể cao hơn.Do đó, bạn có thể thêm trực tiếp MgCl2 để tối ưu hóa nồng độ Mg2+.Nên tăng Mg2+ 0,5mM mỗi lần để tối ưu.

    2. Nhiệt độ ủ PCR quá thấp.
    Gợi ý: Tăng nhiệt độ ủ PCR lên 1℃ hoặc 2℃ mỗi lần.

    3.Sản phẩm PCR quá dài.
    Khuyến nghị: Độ dài của sản phẩm Real Time PCR nên nằm trong khoảng 100-150bp, không quá 500bp.

    4. Các đoạn mồi bị suy giảm và sự xuống cấp của các đoạn mồi sẽ dẫn đến sự xuất hiện của sự khuếch đại cụ thể.
    Đề xuất: Sử dụng điện di SDS-PAGE để phát hiện xem các đoạn mồi có bị phân hủy hay không và thay thế chúng bằng các đoạn mồi mới cho các thí nghiệm Real Time PCR.

    5. Hệ thống PCR không phù hợp hoặc hệ thống quá nhỏ.
    Gợi ý: Hệ thống phản ứng PCR quá nhỏ sẽ làm giảm độ chính xác phát hiện.Tốt nhất là sử dụng hệ thống phản ứng được đề xuất bởi công cụ PCR định lượng để chạy lại thí nghiệm Real Time PCR.

    Độ lặp lại kém của các giá trị định lượng

    1. Máy bị trục trặc.
    Gợi ý: Có thể có lỗi giữa mỗi lỗ PCR của thiết bị, dẫn đến khả năng tái tạo kém trong quá trình quản lý hoặc phát hiện nhiệt độ.Vui lòng kiểm tra theo hướng dẫn của thiết bị tương ứng.

    2. Độ tinh khiết của mẫu không tốt.
    Khuyến nghị: Các mẫu không tinh khiết sẽ dẫn đến khả năng tái tạo kém của thí nghiệm, bao gồm cả độ tinh khiết của mẫu và mồi.Tốt nhất là làm sạch lại mẫu và các mồi được làm sạch tốt nhất bằng SDS-PAGE.

    3. Thời gian chuẩn bị và lưu trữ hệ thống PCR quá dài.
    Gợi ý: Sử dụng hệ thống Real Time PCR cho thí nghiệm PCR ngay sau khi chuẩn bị và không để quá lâu.

    4. Điều kiện khuếch đại PCR không phù hợp, trình tự mồi hoặc nồng độ không phù hợp.
    Gợi ý: khẳng định trình tự mồi đúng và mồi không bị suy thoái;nếu tín hiệu khuếch đại không tốt, cố gắng giảm nhiệt độ ủ và điều chỉnh nồng độ mồi thích hợp.

    5. Hệ thống PCR không phù hợp hoặc hệ thống quá nhỏ.
    Gợi ý: Hệ thống phản ứng PCR quá nhỏ sẽ làm giảm độ chính xác phát hiện.Tốt nhất là sử dụng hệ thống phản ứng được đề xuất bởi công cụ PCR định lượng để chạy lại thí nghiệm Real Time PCR.

    Viết tin nhắn của bạn ở đây và gửi cho chúng tôi

    Có liên quanCác sản phẩm

    Nhấn enter để tìm kiếm hoặc ESC để đóng