Bộ phân lập DNA thực vật Bộ gen tinh sạch DNA thực vật Giao thức thuốc thử
thông số kỹ thuật
50 lớp, 100 lớp, 250 lớp
Bộ kit này sử dụng một cột chỉ chứa DNA có thể liên kết đặc biệt với DNA, Foregene protease và một hệ thống đệm độc đáo, giúp đơn giản hóa rất nhiều quá trình tinh sạch DNA bộ gen của thực vật.Có thể thu được DNA bộ gen chất lượng cao trong vòng 30 phút, giúp tránh được sự xuống cấp của DNA bộ gen.
Màng silica gel chỉ chứa DNA được sử dụng trong cột kéo sợi là vật liệu mới độc đáo của Foregene, có thể liên kết đặc hiệu và hiệu quả với DNA, đồng thời loại bỏ tối đa RNA, protein tạp chất, ion, polysacarit, polyphenol và các hợp chất hữu cơ khác.
thành phần sản phẩm
| Đệm PL1, đệm PL2 |
| Bộ đệm PW, bộ đệm WB, bộ đệm EB |
| Protease tiền thân |
| Cột chỉ DNA |
| Hướng dẫn |
Tính năng & ưu điểm
■ Không nhiễm RNase: Cột Chỉ chứa DNA được cung cấp bởi bộ kit giúp loại bỏ RNA khỏi DNA bộ gen mà không cần RNase bổ sung trong quá trình thí nghiệm, giúp phòng thí nghiệm không bị nhiễm RNase ngoại sinh.
■ Tốc độ nhanh: Protease Foregene có hoạt tính cao hơn các protease tương tự và tiêu hóa các mẫu mô nhanh hơn.
■ Đơn giản: thao tác tách chiết DNA bộ gen có thể hoàn tất trong 30 phút.
■ Thuận tiện: Quá trình ly tâm được thực hiện ở nhiệt độ phòng, không cần ly tâm ở nhiệt độ thấp 4℃ hoặc kết tủa DNA trong ethanol.
■ An toàn: không cần thuốc thử hữu cơ.
■ Chất lượng cao: DNA bộ gen tinh khiết có các đoạn lớn, không có RNA, không có RNase và hàm lượng ion cực thấp, có thể đáp ứng các yêu cầu của các thí nghiệm khác nhau.
ứng dụng bộ
Thích hợp để chiết xuất và tinh chế DNA bộ gen từ các mô thực vật tươi hoặc đông lạnh.
quy trình làm việc
Biểu đồ
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
Bộ sản phẩm có thể được bảo quản trong 12 tháng ở nhiệt độ phòng (15–25℃) và 2–8℃ trong thời gian lâu hơn.
Giải pháp Foregene Protease Plus có công thức độc đáo, hoạt động khi được bảo quản ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài (3 tháng);hoạt tính và tính ổn định của nó sẽ tốt hơn khi được bảo quản ở4℃, vì vậy nên bảo quản ở 4℃, nhớ không bảo quản ở -20℃.
Hướng dẫn phân tích vấn đề
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Năng suất thấp hoặc không có DNA
Thường có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến sản lượng DNA bộ gen, bao gồm nguồn mẫu, tuổi của mẫu, điều kiện bảo quản mẫu và quy trình vận hành.
Không thể thu được DNA bộ gen trong quá trình chiết xuất
1. Mẫu mô được bảo quản không đúng cách hoặc bảo quản quá lâu dẫn đến DNA bộ gen bị phân hủy.
Khuyến nghị: Bảo quản mẫu mô trong nitơ lỏng hoặc -20°C;cố gắng sử dụng các mẫu mới được thu thập để trích xuất DNA bộ gen.
2. Lượng mẫu quá ít có thể khiến DNA bộ gen tương ứng không được chiết xuất.
Gợi ý: Đối với các mẫu mô đã được lưu trữ trong một thời gian dài hoặc có sự phân hủy DNA bộ gen nghiêm trọng, số lượng mẫu mô có thể được tăng lên một cách thích hợp để trích xuất DNA bộ gen đáng kể.Lượng mẫu có thể được xác định theo nhu cầu DNA, nhưng mẫu tươi không được vượt quá 100 mg và mẫu khô không được vượt quá 30 mg.
3. Mẫu không được nghiền bằng nitơ lỏng hoặc để quá lâu sau nitơ lỏng.
Gợi ý: Trong quá trình tách chiết DNA, mẫu cần được nghiền hoàn toàn bằng nitơ lỏng để phá vỡ thành tế bào;sau khi nghiền, vui lòng chuyển bột mẫu sang PL1 đã được làm nóng trước ở 65°C càng sớm càng tốt (một khi bột nghiền tan chảy, DNA bộ gen sẽ bắt đầu phân hủy nhanh chóng).
4. Bảo quản Foregene Protease không đúng cách dẫn đến giảm hoặc mất hoạt tính.
Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của Foregene Protease hoặc thay thế bằng Foregene Protease mới để thủy phân bằng enzym.
5. Bộ bảo quản không đúng cách hoặc bảo quản quá lâu khiến một số linh kiện trong bộ bị hỏng.
Khuyến nghị: Mua một bộ tách chiết DNA bộ gen thực vật mới cho các hoạt động liên quan.
6. Sử dụng bộ dụng cụ không đúng cách.
Gợi ý: Mua Bộ tách DNA thực vật dành riêng cho các mẫu để tách chiết và tinh chế DNA bộ gen của thực vật.
7. Bộ đệm WB mà không cần thêmkhan etanol.
Khuyến nghị: Đảm bảo thêm đúng lượng ethanol tuyệt đối vào Buffer WB.
8. Dung dịch rửa giải không được nhỏ giọt đúng cách lên màng silica.
Gợi ý: Thêm dung dịch rửa giải được làm nóng trước ở 65℃nhỏ từng giọt đến giữa màng silica gel và để ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để tăng hiệu suất rửa giải.
Trích xuất để thu được DNA bộ gen năng suất thấp
1. Mẫu được bảo quản không đúng cách hoặc bảo quản quá lâu dẫn đến DNA bộ gen bị phân hủy.
Khuyến nghị: Bảo quản mẫu mô ở -20℃;cố gắng sử dụng các mẫu mô mới được thu thập để trích xuất DNA bộ gen.
2. Nếu lượng mẫu mô quá ít, DNA bộ gen được chiết xuất sẽ ít hơn.
Gợi ý: Một số mẫu thực vật chứa nhiều nước, chẳng hạn như thực vật thủy sinh như tảo, v.v., liều lượng có thể tăng lên một cách thích hợp hoặc có thể khử nước một chút trước khi thao tác.
3. Mẫu không được nghiền kỹ bằng nitơ lỏng hoặc để quá lâu ở nhiệt độ phòng sau khi nghiền.
Gợi ý: Việc nghiền nitơ lỏng phải đủ và thành tế bào mẫu phải bị phá vỡ càng nhiều càng tốt;ngay sau khi nghiền, bột mẫu phải được chuyển sang 65℃Bộ đệm PL1 được làm nóng trước cho bước tiếp theo.
4. Không sử dụng đúng bộ dụng cụ.
Khuyến nghị: Sử dụng Bộ phân lập DNA thực vật chuyên dụng để chiết xuất và tinh chế DNA bộ gen của thực vật.
5. Bảo quản Foregene Protease không đúng cách dẫn đến giảm hoặc mất hoạt tính.
Khuyến nghị: Xác nhận các điều kiện bảo quản của Foregene Protease hoặc thay thế bằng Foregene Protease mới để thủy phân bằng enzym.
6. Vấn đề rửa giải
Khuyến nghị: Vui lòng sử dụng Buffer EB để rửa giải;nếu dùng ddH2O hoặc các chất rửa giải khác, đảm bảo độ pH của chất rửa giải nằm trong khoảng 7,0-8,5.
7. Dung dịch rửa giải không được nhỏ giọt đúng cách
Gợi ý: Vui lòng thêm giọt rửa giải vào giữa màng silica và để ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để tăng hiệu quả rửa giải.
8. Thể tích rửa giải quá nhỏ
Gợi ý: Vui lòng sử dụng dung dịch rửa giải để rửa giải DNA bộ gen theo hướng dẫn, ít nhất không dưới 100μl.
Chiết xuất DNA bộ gen với độ tinh khiết thấp
Độ tinh khiết thấp của DNA bộ gen sẽ dẫn đến thất bại hoặc hiệu quả kém của các thí nghiệm xuôi dòng, chẳng hạn như: không thể cắt enzyme và không thể thu được đoạn gen mục tiêu bằng PCR.
1. Nhiễm protein khác, nhiễm RNA.
Phân tích: Buffer PW không được sử dụng để rửa cột;Bộ đệm PW không được sử dụng để rửa cột ở tốc độ ly tâm chính xác.
Gợi ý: cố gắng đảm bảo rằng không có kết tủa trong phần nổi phía trên khi phần nổi phía trên được truyền qua cột;đảm bảo rửa cột tinh chế bằng Buffer PW theo hướng dẫn và không thể bỏ qua bước này.
2. Ô nhiễm ion tạp chất.
Phân tích: Cột rửa Buffer WB đã bị bỏ qua hoặc chỉ rửa một lần, dẫn đến ô nhiễm ion còn lại.
Khuyến nghị: Đảm bảo rửa hai lần bằng Buffer WB theo hướng dẫn để loại bỏ các ion dư càng nhiều càng tốt.
3. Nhiễm RNase.
Phân tích: RNase ngoại sinh được thêm vào Bộ đệm;hoạt động rửa không chính xác trong Bộ đệm PW sẽ dẫn đến RNase còn lại và ảnh hưởng đến các hoạt động thử nghiệm RNA xuôi dòng, chẳng hạn như phiên mã trong ống nghiệm.
Đề xuất: Bộ dụng cụ chiết xuất axit nucleic sê-ri Foregene có thể loại bỏ RNA mà không cần RNase bổ sung và tất cả các thuốc thử trong Bộ dụng cụ phân lập DNA thực vật đều không cần RNase;đảm bảo rửa cột tinh chế bằng Buffer PW theo hướng dẫn và không thể bỏ qua bước này.
4. Dư lượng etanol.
Phân tích: Sau khi rửa cột tinh chế bằng Buffer WB, không thực hiện ly tâm ống rỗng.
Khuyến nghị: Thực hiện theo các hướng dẫn để ly tâm ống rỗng thích hợp.
Cẩm nang hướng dẫn:
Hướng dẫn sử dụng Kit phân lập DNA thực vật
