Bất kể người mua hàng mới hay khách hàng cũ, Chúng tôi tin tưởng vào mối quan hệ lâu dài và đáng tin cậy đối với việc cung cấp OEM Bộ công cụ chiết xuất hoặc tinh chế axit nucleic của vi rút hạt từ tính chất lượng cao, Chúng tôi nồng nhiệt chào đón khách hàng, hiệp hội doanh nghiệp và bạn bè từ khắp nơi trên thế giới liên hệ với chúng tôi và tìm kiếm sự hợp tác để cùng có lợi.
Bất kể người mua hàng mới hay khách hàng cũ, Chúng tôi tin tưởng vào mối quan hệ lâu dài và đáng tin cậy choBộ xét nghiệm PCR và axit nucleic của Trung Quốc, Cho dù chọn một sản phẩm hiện tại từ danh mục của chúng tôi hay tìm kiếm hỗ trợ kỹ thuật cho ứng dụng của bạn, bạn có thể trao đổi với trung tâm dịch vụ khách hàng của chúng tôi về các yêu cầu tìm nguồn cung ứng của mình.Chúng tôi rất mong được hợp tác với bạn bè từ khắp nơi trên thế giới.
Tài liệu chỉ dẫn:

Bất kể người mua hàng mới hay khách hàng cũ, Chúng tôi tin tưởng vào mối quan hệ lâu dài và đáng tin cậy đối với việc cung cấp OEM Bộ công cụ chiết xuất hoặc tinh chế axit nucleic của vi rút hạt từ tính chất lượng cao, Chúng tôi nồng nhiệt chào đón khách hàng, hiệp hội doanh nghiệp và bạn bè từ khắp nơi trên thế giới liên hệ với chúng tôi và tìm kiếm sự hợp tác để cùng có lợi.
Cung cấp OEMBộ xét nghiệm PCR và axit nucleic của Trung Quốc, Cho dù chọn một sản phẩm hiện tại từ danh mục của chúng tôi hay tìm kiếm hỗ trợ kỹ thuật cho ứng dụng của bạn, bạn có thể trao đổi với trung tâm dịch vụ khách hàng của chúng tôi về các yêu cầu tìm nguồn cung ứng của mình.Chúng tôi rất mong được hợp tác với bạn bè từ khắp nơi trên thế giới.

Hướng dẫn phân tích vấn đề

Sau đây là phần phân tích các vấn đề có thể gặp phải trong quá trình tách chiết DNA/RNA của virus, hy vọng sẽ hữu ích cho các thí nghiệm của bạn.Ngoài ra, đối với các vấn đề thử nghiệm hoặc kỹ thuật khác ngoài hướng dẫn vận hành và phân tích vấn đề, chúng tôi có bộ phận hỗ trợ kỹ thuật riêng để giúp bạn.Quý khách có nhu cầu vui lòng liên hệ: 028-83360257 hoặc E-mail:

Tech@foregene.com.

Không chiết xuất axit nucleic hoặc năng suất axit nucleic thấp

Thông thường có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất thu hồi, chẳng hạn như: hàm lượng axit nucleic của mẫu, phương pháp vận hành, thể tích rửa giải, v.v.

Phân tích các nguyên nhân phổ biến:

1. Quá trình ly tâm trong bể nước đá hoặc nhiệt độ thấp (4°C) được thực hiện trong quy trình.

Gợi ý: Vận hành ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong toàn bộ quá trình, không ngâm nước đá và ly tâm ở nhiệt độ thấp.

2. Bảo quản mẫu không đúng cách hoặc bảo quản mẫu quá lâu.

Khuyến nghị: Bảo quản mẫu ở -80°C và tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần;cố gắng sử dụng các mẫu mới được thu thập để chiết xuất axit nucleic.

3. Ly giải mẫu không đủ.

Khuyến nghị: Vui lòng đảm bảo rằng mẫu và dung dịch làm việc ly giải được trộn kỹ và ủ ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong 10 phút.

4. Thêm dung dịch rửa giải không chính xác.

Gợi ý: Đảm bảo rằng ddH2O không có RNase được thêm từng giọt vào giữa màng cột tinh chế và không làm rơi nó trên vòng cột tinh chế.

5. Thể tích chính xác của ethanol tuyệt đối đã không được thêm vào Buffer RW2.

Gợi ý: Vui lòng làm theo hướng dẫn, thêm đúng lượng ethanol tuyệt đối vào Buffer RW2 và trộn đều trước khi sử dụng bộ kit.

6. Thể tích mẫu không phù hợp.

Gợi ý: 200µl mẫu được xử lý cho mỗi 500µl Buffer DRL.Quá trình xử lý mẫu quá mức sẽ dẫn đến năng suất chiết xuất axit nucleic thấp hơn.

7. Thể tích rửa giải không phù hợp hoặc rửa giải không đầy đủ.

Khuyến nghị: Thể tích rửa giải của cột tinh chế là 30-50μl;nếu hiệu quả rửa giải không đạt yêu cầu, nên kéo dài thời gian ở nhiệt độ phòng sau khi thêm ddH2O không chứa RNase đã được làm nóng trước, chẳng hạn như 5-10 phút.

8. Ethanol còn lại trên cột sau khi rửa bằng Buffer RW2.

Gợi ý: Nếu vẫn còn etanol sau khi ly tâm với Buffer RW2 trong 2 phút, cột có thể được đặt ở nhiệt độ phòng trong 5 phút sau khi ly tâm để loại bỏ hoàn toàn etanol còn sót lại.

Axit nucleic tinh khiết bị phân hủy

Chất lượng của axit nucleic tinh khiết có liên quan đến việc bảo quản mẫu, sự nhiễm bẩn RNase, hoạt động và các yếu tố khác.Phân tích các nguyên nhân phổ biến:

1. Các mẫu được lấy không được lưu trữ kịp thời.

Gợi ý: Nếu mẫu không được sử dụng kịp thời sau khi lấy, vui lòng bảo quản ngay ở -80°C ở nhiệt độ thấp.Để chiết xuất RNA, hãy cố gắng sử dụng các mẫu mới được thu thập.

2. Lấy mẫu và làm đông lạnh và rã đông nhiều lần.

Đề xuất: Tránh đông lạnh và rã đông (không quá một lần) trong quá trình lấy và bảo quản mẫu, nếu không sản lượng axit nucleic sẽ bị giảm.

3. RNase được đưa vào phòng phẫu thuật hoặc không đeo găng tay, khẩu trang, v.v. dùng một lần.

Khuyến nghị: Các thí nghiệm chiết xuất RNA được thực hiện tốt nhất trong phòng thao tác RNA riêng biệt và bàn thí nghiệm nên được làm sạch trước khi thí nghiệm.

Đeo găng tay và khẩu trang dùng một lần trong suốt quá trình thí nghiệm để tránh sự phân hủy RNA do đưa RNase vào mức độ lớn nhất.

4. Thuốc thử bị nhiễm RNase trong quá trình sử dụng.

Khuyến nghị: Thay thế bằng Bộ phân lập DNA/RNA của Vi-rút mới cho các thí nghiệm liên quan.

5. Các ống ly tâm và đầu pipet được sử dụng để thao tác RNA bị nhiễm RNase.

Đề xuất: Đảm bảo rằng các ống ly tâm, đầu pipet, pipet, v.v. được sử dụng để chiết xuất RNA đều không chứa RNase.

Axit nucleic tinh khiết ảnh hưởng đến các thí nghiệm xuôi dòng

DNA và RNA được tinh chế bằng cột tinh chế, nếu hàm lượng ion muối và protein quá cao sẽ ảnh hưởng đến các thí nghiệm tiếp theo, chẳng hạn như: khuếch đại PCR, sao chép ngược, v.v.

1. DNA và RNA rửa giải có dư các ion muối.

Gợi ý: Đảm bảo thêm đúng thể tích etanol tuyệt đối vào Bộ đệm RW2 và rửa cột tinh chế hai lần ở tốc độ ly tâm được chỉ định trong hướng dẫn vận hành;Thực hiện ly tâm để giảm thiểu ô nhiễm ion muối.

2. DNA và RNA rửa giải có dư lượng ethanol.

Đề xuất: Sau khi xác nhận việc rửa bằng Bộ đệm RW2, hãy thực hiện ly tâm ống rỗng ở tốc độ ly tâm trong hướng dẫn vận hành;nếu vẫn còn cặn ethanol, bạn có thể ly tâm ống rỗng rồi đặt ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để loại bỏ cặn ethanol ở mức tối đa.

Tài liệu chỉ dẫn:

Hướng dẫn sử dụng Kit phân lập DNA & RNA virus