Tổ chức tuân thủ khái niệm quy trình “quản lý khoa học, tính ưu việt về chất lượng và hiệu quả, người mua tối cao đối với Nhà sản xuất Trung Quốc cho 2× Premix đậm đặc cho mẫu chưa tinh khiết Đầu dò PCR định lượng trực tiếp PCR thời gian thực Qpcr Mix Plus U, Doanh nghiệp của chúng tôi tận tâm mang đến cho khách hàng những sản phẩm chất lượng hàng đầu đáng kể và an toàn với mức giá hợp lý, khiến mọi khách hàng đều hài lòng với dịch vụ của chúng tôi.
Tổ chức tiếp tục khái niệm quy trình quản lý khoa học, tính ưu việt của chất lượng và hiệu quả cao, người mua tối cao choTrung Quốc Taq DNA polymerase và Qpcr, Công ty chúng tôi có sức mạnh dồi dào và sở hữu một hệ thống mạng lưới bán hàng ổn định và hoàn hảo.Chúng tôi mong muốn chúng tôi có thể thiết lập mối quan hệ kinh doanh lành mạnh với tất cả khách hàng trong và ngoài nước trên cơ sở cùng có lợi.
Nguyên tắc thiết kế mồi Real Time PCR

Sơn lót xuôi và sơn lót ngược

Đối với Real Time PCR, thiết kế mồi rất quan trọng.Các đoạn mồi liên quan đến tính đặc hiệu và hiệu quả của quá trình khuếch đại PCR và có thể được thiết kế dựa trên các nguyên tắc sau:

• Chiều dài mồi: 18-30bp.
• hàm lượng GC: 40-60%.
• Giá trị Tm: Phần mềm thiết kế mồi, chẳng hạn như Primer 5, có thể đưa ra giá trị Tm của mồi.Các giá trị Tm của đoạn mồi ngược dòng và xuôi dòng phải càng gần càng tốt.Công thức tính Tm cũng có thể được sử dụng: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Khi thực hiện PCR, nhiệt độ dưới giá trị Tm mồi là 5 °C thường được chọn làm nhiệt độ ủ (sự gia tăng tương ứng của nhiệt độ ủ có thể làm tăng tính đặc hiệu của phản ứng PCR).
• Mồi và sản phẩm PCR:

1. Độ dài sản phẩm khuếch đại PCR mồi thiết kế tốt nhất là 100-150bp.
2. Nên tránh sơn lót thiết kế trong khu vực cấu trúc thứ cấp của mẫu càng nhiều càng tốt.
3. Tránh hình thành 2 hoặc nhiều bazơ bổ sung giữa 3′ đầu của mồi ngược dòng và xuôi dòng.
4. Không thể xuất hiện đế đầu cuối của mồi 3′ với 3 G hoặc C liên tiếp bổ sung.
5. Bản thân mồi không thể có cấu trúc bổ sung, nếu không cấu trúc kẹp tóc sẽ được hình thành, ảnh hưởng đến quá trình khuếch đại PCR.
6. ATCG nên được phân phối càng đồng đều càng tốt trong trình tự mồi và nên tránh cơ sở đầu cuối 3′ là T.

ruột thừa1：Ctrực tiếpRT-qPCR bộ thành phầngói bổ sung t

1.Giải pháp ly giải tế bào

 Tổ chức tuân thủ khái niệm quy trình “quản lý khoa học, tính ưu việt về chất lượng và hiệu quả, người mua tối cao đối với Nhà sản xuất Trung Quốc cho 2× Premix đậm đặc cho mẫu chưa tinh khiết Đầu dò PCR định lượng trực tiếp PCR thời gian thực Qpcr Mix Plus U, Doanh nghiệp của chúng tôi tận tâm mang đến cho khách hàng những sản phẩm chất lượng hàng đầu đáng kể và an toàn với mức giá hợp lý, khiến mọi khách hàng đều hài lòng với dịch vụ của chúng tôi.
Nhà sản xuất Trung Quốc choTrung Quốc Taq DNA polymerase và Qpcr, Công ty chúng tôi có sức mạnh dồi dào và sở hữu một hệ thống mạng lưới bán hàng ổn định và hoàn hảo.Chúng tôi mong muốn chúng tôi có thể thiết lập mối quan hệ kinh doanh lành mạnh với tất cả khách hàng trong và ngoài nước trên cơ sở cùng có lợi.

Nguyên tắc thiết kế mồi Real Time PCR

Sơn lót xuôi và sơn lót ngược

Đối với Real Time PCR, thiết kế mồi rất quan trọng.Các đoạn mồi liên quan đến tính đặc hiệu và hiệu quả của quá trình khuếch đại PCR và có thể được thiết kế dựa trên các nguyên tắc sau:

• Chiều dài mồi: 18-30bp.
• hàm lượng GC: 40-60%.
• Giá trị Tm: Phần mềm thiết kế mồi, chẳng hạn như Primer 5, có thể đưa ra giá trị Tm của mồi.Các giá trị Tm của đoạn mồi ngược dòng và xuôi dòng phải càng gần càng tốt.Công thức tính Tm cũng có thể được sử dụng: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Khi thực hiện PCR, nhiệt độ dưới giá trị Tm mồi là 5 °C thường được chọn làm nhiệt độ ủ (sự gia tăng tương ứng của nhiệt độ ủ có thể làm tăng tính đặc hiệu của phản ứng PCR).
• Mồi và sản phẩm PCR:

1. Độ dài sản phẩm khuếch đại PCR mồi thiết kế tốt nhất là 100-150bp.
2. Nên tránh sơn lót thiết kế trong khu vực cấu trúc thứ cấp của mẫu càng nhiều càng tốt.
3. Tránh hình thành 2 hoặc nhiều bazơ bổ sung giữa 3′ đầu của mồi ngược dòng và xuôi dòng.
4. Không thể xuất hiện đế đầu cuối của mồi 3′ với 3 G hoặc C liên tiếp bổ sung.
5. Bản thân mồi không thể có cấu trúc bổ sung, nếu không cấu trúc kẹp tóc sẽ được hình thành, ảnh hưởng đến quá trình khuếch đại PCR.
6. ATCG nên được phân phối càng đồng đều càng tốt trong trình tự mồi và nên tránh cơ sở đầu cuối 3′ là T.

ruột thừa1：Ctrực tiếpRT-qPCR bộ thành phầngói bổ sung t

1.Giải pháp ly giải tế bào

Tài liệu chỉ dẫn:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman