Giới thiệu:

Các phân tử RNA có thể tương tác rộng rãi với các phân tử sinh học khác, chẳng hạn như protein, DNA và RNA, và do đó tồn tại trong tế bào và sinh vật dưới dạng phức hợp đại phân tử.Trong số đó, phức hợp RNA-protein là sự tồn tại và chức năng của RNA Một trong những dạng quan trọng của.Kéo xuống RNA là một phương pháp cổ điển để sàng lọc và xác định các phân tử RNA, đặc biệt là các protein tương tác của các phân tử lncRNA và được phần lớn các nhà nghiên cứu cũng như các tạp chí học thuật quốc tế có thẩm quyền công nhận.Hôm nay FORREGENE sẽ chia sẻ với các bạn nguyên lý thí nghiệm và quy trình kỹ thuật RNA pull-down, có thể các bạn sẽ sử dụng được

1. Nguyên lý thí nghiệm của công nghệ kéo xuống RNA:

Phiên mã in vitro và tổng hợp các đoạn lncRNA hoặc lncRNA đích được đánh dấu biotin (bao gồm cả các đoạn RNA được sử dụng làm đối chứng dương tính và âm tính), và ủ với dịch chiết tế bào;sử dụng các hạt từ tính neo avidin để thu thập các phức hợp RNA-protein hoặc RNA-RNA, Sau khi rửa kỹ, phức hợp này được rửa giải.Nếu phát hiện phân tử đích protein tương tác với lncRNA, hãy thực hiện điện di protein trên sản phẩm kéo xuống RNA, phát hiện protein đích bằng cách nhuộm bạc và cắt gel để đo khối phổ;cũng trực tiếp thực hiện xác minh Western blot trên sản phẩm kéo xuống;nếu được phát hiện Đối với các phân tử đích RNA tương tác với lncRNA, các sản phẩm kéo xuống RNA sẽ được chiết xuất RNA và quá trình phát hiện qRT-PCR cụ thể được thực hiện.

2. Quy trình thí nghiệm công nghệ kéo xuống RNA:

3. Dịch vụ kỹ thuật kéo xuống RNA của FOREGENE:

Nuôi cấy tế bào

Chuẩn bị chiết xuất protein tổng số tế bào / hạt nhân / huyết tương

Thí nghiệm kéo xuống RNA

Điện di SDS-PAGE, nhuộm bạc

Phép đo khối phổ và thí nghiệm WB

báo cáo thí nghiệm

4. Trường hợp thực nghiệm

Hình dưới đây cho thấy kết quả kéo xuống RNA của FJ Bio-Bio và phát hiện điện di SDS-PAGE, trong đó mũi tên màu đỏ đánh dấu dải khác biệt:

Nhóm nghiên cứu của Giáo sư Song Xu của Đại học Tứ Xuyên đã tích lũy được 15 năm tích lũy lâu dài trong lĩnh vực nghiên cứu lncRNA.Foregene Bio và nhóm nghiên cứu của Giáo sư Song Xu đã hợp tác cho ra mắt công nghệ kéo xuống RNA của lncRNA, công nghệ này sẽ mang lại cho bạn kết quả khả quan cho thí nghiệm của mình.