Khai thác axit nucleic là một kỹ năng mở đầu cho các thí nghiệm sinh học phân tử.Nó có thể nắm vững và sử dụng thành thạo kỹ năng này hay không cũng trở thành điều kiện tiên quyết để những người thí nghiệm sau này thăng cấp thành bậc thầy thí nghiệm.
Theo các tài liệu nghiên cứu khác nhau, các nhà thí nghiệm chủ yếu được chia thành ba loại sau:
Chuyên ngành Động vật, Chuyên ngành Thực vật, Chuyên ngành Vi sinh
Mỗi loại người thí nghiệm sẽ tiếp tục sao chép các bản sao để trau dồi một bộ kỹ năng độc quyền cho các mẫu cụ thể.
Hôm nay, biên tập viên muốn mang một số thiết bị và đạo cụ không có trong ngục tối cho những người thử nghiệm.Với chúng, bạn có thể nhanh chóng nâng cấp theo mọi hướng.Nó không phải là một giấc mơ để trở thành một vị thần thử nghiệm.
Vấn đề này dành cho những nhà thực nghiệm chuyên nghiệp về thực vật (những nhà thực nghiệm của các ngành nghề khác cũng có thể học hỏi từ nó ~).
Tôi tin rằng mọi thế hệ những người làm thí nghiệm đều sẽ nghe nói về các phương pháp chiết xuất axit nucleic thực vật cổ điển được những người tiền nhiệm của họ truyền từ thế hệ này sang thế hệ khác.Ba tên tuổi lớn trong ngành khai thác thực vật.
Dù các ông lớn rất xuất sắc nhưng vẫn có những thiếu sót khó tránh khỏi.
phương pháp TRIzol
Thường dùng để chiết xuất
ARN
●Độc và cồng kềnh
●Chứa ô nhiễm bộ gen
phương pháp CTAB
Thường dùng để chiết xuất
bộ genADN
●Tốn thời gian
●Khó loại bỏ CTAB bằng cách rửa hơn muối, một lượng nhỏ cặn sẽ ảnh hưởng rất lớn đến hoạt động của enzyme
phương pháp SDS
Thường dùng để chiết xuất
plasmid
●Không phù hợp với cây có hàm lượng polysacarit cao
●Ô nhiễm đạm
Trong xã hội hiện đại với tốc độ lặp lại cập nhật gấp đôi này, các phương pháp vận hành truyền thống không còn có thể đáp ứng nhu cầu của những người thử nghiệm và việc nâng cấp thiết bị sắp diễn ra.
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit đã được thử nghiệm N lần bởi hàng chục nhà thí nghiệm.Nó rất đơn giản để vận hành, không sử dụng bất kỳ thuốc thử độc hại nào và không thêm bất kỳ enzym nào.Axit nucleic thu được có độ tinh khiết cao, rất cần thiết cho hoạt động chiết xuất hàng ngày của các nhà thí nghiệm xuất sắc.
Bộ phân lập RNA tiền thân
Ở đây, tôi cũng sẽ tiết lộ một kỹ thuật vận hành ẩn cho những người thí nghiệm, đó là chọn phương pháp chiết xuất thích hợp theo loại thực vật (phương pháp xác định loại thực vật có ở cuối bài viết!), Bởi vì một số polysacarit thực vật và polyphenol có hàm lượng cao, và các phương pháp truyền thống có thể gây chết người.Không đủ để kiểm soát.
Chà, nó là như thế này ...
Phương pháp TRIzol quỳ trực tiếp dưới các mẫu có hàm lượng polysaccharid và polyphenol cao như lá chuối, lá bạch quả, lá bông vải.
Với mục đích này, Foregene đã phát triển hai công cụ hiệu quả cho các nhà thí nghiệm.Bộ chiết xuất RNA thực vật có hàm lượng polysacarit và polyphenol thấp và hàm lượng polysacarit và polyphenol cao có thể tiêu diệt kẻ thù một cách có mục tiêu, do đó những người thí nghiệm không còn sợ các loại thực vật khác nhau.Chỉ cần thay đổi thiết bị trực tiếp!
Ngoài việc cần nâng cấp phương pháp chiết xuất, các thao tác tiền xử lý mẫu cũng cần được nâng cấp.
Do cấu trúc đặc biệt của các mẫu thực vật, rễ và thân cứng hơn của một số loại cây khó nghiền và nghiền đều hơn.
Trong ngành công nghiệp mài, khoảng 80% người sử dụng nitơ lỏng để mài, trong khi chưa đến 20% sử dụng máy mài điện và dao động hạt mài.
Mặc dù quá trình nghiền bằng nitơ lỏng rẻ và dễ sử dụng, nhưng việc nghiền mỗi lần và tốn nhiều công sức là một cơn ác mộng đối với những người thí nghiệm với nhu cầu mẫu lớn!Nếu vữa không được làm sạch sẽ gây nhiễm chéo giữa các mẫu.
Tác dụng của mài điện khác nhau ở mỗi người và thói quen vận hành của người thí nghiệm sẽ có tác động lớn hơn đến tính toàn vẹn của axit nucleic, và nếu cần thiết, cần vận hành ở nhiệt độ thấp.
vì vậy, dao động hạt mài có thể được coi là thiết bị mài đơn giản và hiệu quả hiện nay.
Các chế độ dao động phổ biến bao gồm dao động dọc, dao động tịnh tiến ngang và ba chiều (dao động ngang).Tuy nhiên, máy nghiền mô của Foregene phá vỡ mô hình hiện có và áp dụng phương pháp dao động 4D mới để làm cho quá trình nghiền đồng đều hơn.
Đáp ứng các yêu cầu mẫu khác nhau, dễ vận hành
Công nghệ nghiền 4D độc đáo, hiệu quả nghiền tăng 20%
Mẫu hoàn toàn kín, không lây nhiễm chéo
Yên tĩnh, ≤56 decibel
So sánh kết quả của thí nghiệm với một làn sóng ~
Mẫu thử: Lá lúa mì 50mg (hàm lượng polysacarit và polyphenol thấp)
Chiết xuất axit nucleic loại: RNA
Lượng tại chỗ: 5μl
Bộ tách chiết được sử dụng là Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)
So sánh dữ liệu và đồ thị điện di, có thể thấy rằng nồng độ và độ tinh khiết của RNA được chiết xuất sau khi nghiền bằng máy cao hơn so với nghiền bằng nitơ lỏng.Đồng thời, do máy nghiền có thể phá vỡ mẫu hoàn toàn hơn, RNA nhỏ có thể được chiết xuất tốt hơn và tính toàn vẹn của RNA có thể được duy trì.
Mẫu thử: Lá bạch quả 50mg (hàm lượng polysaccharid và polyphenol cao)
Chiết xuất axit nucleic loại: RNA
Lượng tại chỗ: 5μl
Sử dụng Bộ trích xuất RNA tổng số từ thực vật Foregene Polysaccharide Polyphenol (RE-05021)
Hãy xem nhóm mẫu này có hàm lượng polysacarit và polyphenol cao.Hiệu quả thậm chí còn rõ ràng hơn.Với cùng độ tinh khiết, nồng độ RNA của máy nghiền gần gấp 5 lần so với nghiền bằng nitơ lỏng và RNA nhỏ vẫn có thể nhìn thấy mờ ~
Nếu bạn cảm thấy không có thiết bị nào ở trên đủ nhanh, thì biên tập viên phải nghĩ ra thiết bị tối thượng!
Chuỗi PCR trực tiếp thực vật
Điểm độc đáo của thiết bị này là lá hoặc hạt của cây không cần phải nghiền nát mà được ném trực tiếp vào ống EP để ly giải, và hỗn hợp ly giải thu được có thể được sử dụng làm khuôn mẫu cho phản ứng PCR.Nó đơn giản như một bước nhanh hơn!Đồng thời, dòng máy PCR trực tiếp của Foregene Plants được trang bị hệ thống chống ô nhiễm UNG nên người thí nghiệm không còn lo lắng về ô nhiễm sol khí trong phòng thí nghiệm và có thể dễ dàng thực hiện thí nghiệm.
Mẹo đánh giá:
Làm thế nào để đánh giá xem đó có phải là nhà máy polysacarit polyphenol hay không
Lấy khối mô khoảng 20mg cho vào ống ly tâm sạch 1,5ml, thêm 200ul dung dịch NaOH 200mM, để ở 95℃ trong 10 phút, quan sát sự thay đổi màu sắc sau khi ly giải
1. Nếu màu của dịch ly giải là xanh lục hoặc vàng nhạt, điều đó có nghĩa là hàm lượng polyphenol trong mô thấp và nên sử dụng dòng Foregene Plant
2. Nếu dịch ly giải có màu vàng nâu hoặc đỏ nâu, điều đó có nghĩa là hàm lượng polyphenol trong mô cao và nên sử dụng Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus Series
Thời gian đăng bài: 20-08-2021
