Bạn vẫn đang sử dụng Trizol để trích xuất RNA chứ?
Chúa ơi, đừng để tôi lo lắng về sức khỏe của bạn!
Trizol sắp bị ra rìa, đừng nói là bạn vẫn còn trong bóng tối nhé?

Thành phần chính của thuốc thử Trizol là phenol và các thuốc thử hữu cơ như chloroform cũng được thêm vào trong quá trình thử nghiệm.Nếu tiếp xúc lâu dài sẽ gây hại cho sức khỏe, đặc biệt tiếp xúc trực tiếp qua da có thể gây bỏng hóa chất nặng và để lại sẹo vĩnh viễn.

Trong các trường hợp bình thường, các đối tác của phòng thí nghiệm chỉ có thể giảm thiểu các mối nguy hiểm bằng cách trang bị đầy đủ cho họ (mặc áo khoác phòng thí nghiệm, đeo găng tay và khẩu trang).

Và lời khuyên của mình cho bạn là: hãy thay Trizol trực tiếp để tránh hại nguồn.

1. Sản phẩm thế hệ đầu tiên của chiết xuất RNA
Ra đời năm 1987 (thuốc thử Trizol)

lợi thế:
Khai thác hoàn chỉnh hơn

Nhược điểm:
Thuốc thử độc hại như guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform là bắt buộc;
Thao tác rườm rà;
Cần sử dụng DNase để loại bỏ ô nhiễm DNA

2. Sản phẩm chiết xuất RNA thế hệ thứ hai
Ra đời năm 1994 (QIAGEN RNeasy và hầu hết các sản phẩm nội địa)

lợi thế:
Phương pháp ly tâm cột được áp dụng, dễ vận hành;

Điều bất lợi:
Cần ly tâm để loại bỏ mảnh vụn mô
Cần sử dụng DNase để loại bỏ ô nhiễm DNA

3.Sản phẩm chiết xuất RNA thế hệ thứ ba
Ra mắt vào năm 2005 (QIAGEN RNeasy Plus và ForegeneDòng sản phẩm tinh chế RNA)

lợi thế:
Trực tiếp sử dụng cột loại bỏ DNA để loại bỏ DNA và mảnh vụn mô cùng một lúc, tiết kiệm thời gian và công sức;
An toàn, tiện lợi, không cần thêm cột lọc và DNase dễ dàng loại bỏ tạp chất, tránh nhiễm bẩn DNA

Hãy xem xét sự khác biệt về hoạt động giữa sản phẩm thế hệ thứ nhất (Trizol), sản phẩm thế hệ thứ hai (RNeasy) và sản phẩm thế hệ thứ ba (Foregene) của chiết xuất RNA:

Hoạt động trong hình rất rõ ràng: sản phẩm thế hệ thứ ba có những ưu điểm rõ ràng

Chỉ ba từ để mô tả: dễ dàng!Nhanh!Sự an toàn

Biểu đồ PK của kết quả thí nghiệmvìcác sản phẩm chiết xuất RNA thế hệ thứ nhất, thứ hai và thứ ba:

1. Eđiện di đồ

Thế hệ thứ nhất (1: Trizol)
Thế hệ thứ hai (2:QIAGEN dễ dàng)
Thế hệ thứ ba (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Loại sản phẩm nào tốt, bạn sẽ biết bằng cách so sánh
RNA được chiết xuất bằng bộ Foregene
Không chỉ có nồng độ cao mà còn có tính toàn vẹn tốt

2.qPCR graph (đồ thị đường cong khuếch đại)

Thế hệ thứ nhất (Trizol)

Thế hệ thứ hai (màu xanh da trờicó nghĩaQIAGEN RNeasy-, màu đỏcó nghĩaQIAGEN RNeasy +)

Thế hệ thứ ba (xanh lam nghĩa là Foregene, xanh lá cây nghĩa là QIAGEN RNeasy plus)

(Lưu ý: Đồ thị QIAGEN RNeasy của qPCR thế hệ thứ hai có nghĩa là bộ kit không thêm DNase và không loại bỏ ô nhiễm DNA. Do đó, CT cao hơn và kết quả không chính xác; QIAGEN RNeasy + có nghĩa là DNase đã được thêm vào và ô nhiễm DNA đã được loại bỏ và kết quả là chính xác)

Dù là điện di đồ hay đồ thị đường cong khuếch đại PCR định lượng thì chất lượng của sản phẩm Foregene không hề thua kém các sản phẩm ngoại nhập.