Bộ dụng cụ phân lập DNA & RNA của virus Bộ dụng cụ chuẩn bị tinh chế tách chiết DNA và RNA của virus
thông số kỹ thuật
50 lớp chuẩn bị, 200 lớp chuẩn bị
Bộ dụng cụ tách chiết chiết xuất làm sạch axit nucleic RNA của virus sử dụng cột quay và công thức do Foregene phát triển, có thể chiết xuất hiệu quả RNA virus có độ tinh khiết và chất lượng cao từ các mẫu như huyết tương, huyết thanh, dịch cơ thể không có tế bào và dịch nổi nuôi cấy tế bào.Bộ này đặc biệt bổ sung Linear Acrylamide, có thể dễ dàng thu được một lượng nhỏ RNA từ các mẫu.Cột chỉ RNA có thể liên kết RNA một cách hiệu quả.Bộ có thể xử lý một số lượng lớn mẫu cùng một lúc.
Toàn bộ bộ kit không chứa RNase nên RNA tinh khiết sẽ không bị phân hủy.Bộ đệm viRW1 và Bộ đệm viRW2 có thể đảm bảo rằng axit nucleic của virus thu được không chứa protein, nuclease hoặc các tạp chất khác, có thể được sử dụng trực tiếp cho các thí nghiệm sinh học phân tử tiếp theo.
thành phần bộ
| Acrylamit tuyến tính |
| Bộ đệm DRL |
| Bộ đệm RW1, Bộ đệm RW2 |
| ddH không có RNase2O |
| Cột DNA/RNA |
| Hướng dẫn |
Tính năng & ưu điểm
■ Vận hành ở nhiệt độ phòng (15-25℃) trong toàn bộ quá trình, không cần ngâm nước đá và ly tâm ở nhiệt độ thấp.
■ Bộ kit hoàn chỉnh Không chứa RNase, không cần lo lắng về sự phân hủy RNA.
■ Năng suất axit nucleic cao: Cột chỉ chứa DNA/RNA và công thức độc đáo có thể tinh sạch DNA và RNA một cách hiệu quả.
■ Công suất xử lý mẫu lớn: có thể xử lý tới 200μl mẫu mỗi lần.
■ Tốc độ nhanh: dễ vận hành và có thể hoàn thành trong vòng 20 phút.
■ An toàn: không cần thuốc thử hữu cơ.
■ Chất lượng cao: Các đoạn RNA tinh khiết có độ tinh khiết cao, không chứa protein và các tạp chất khác, có thể đáp ứng các ứng dụng thử nghiệm hạ nguồn khác nhau.
ứng dụng bộ
Nó phù hợp để chiết xuất và tinh chế axit nucleic của virus trong các mẫu như huyết tương, huyết thanh, dịch cơ thể không có tế bào và chất nổi trên bề mặt nuôi cấy tế bào.
quy trình làm việc
Biểu đồ
Lưu trữ và thời hạn sử dụng
■ Bộ dụng cụ này có thể được bảo quản trong 24 tháng trong điều kiện khô ráo ở nhiệt độ phòng (15-25℃);nếu cần bảo quản trong thời gian dài hơn, có thể bảo quản ở nhiệt độ 2–8℃.
■ Dung dịch Acrylamide dạng tuyến tính có thể bảo quản ở nhiệt độ phòng trong 7 ngày;sau khi nhận được bộ dụng cụ, vui lòng lấy bộ dụng cụ ra và bảo quản ở -20°C.
■ Sau khi thêm Linear Acrylamide vào Buffer DRL, nó có thể được bảo quản ở 2-8°C trong tối đa 48 giờ.Vui lòng sử dụng giải pháp làm sẵn.
Hướng dẫn phân tích vấn đề
Sau đây là phần phân tích các vấn đề có thể gặp phải trong quá trình tách chiết DNA/RNA của virus, hy vọng sẽ hữu ích cho các thí nghiệm của bạn.Ngoài ra, đối với các vấn đề thử nghiệm hoặc kỹ thuật khác ngoài hướng dẫn vận hành và phân tích vấn đề, chúng tôi có bộ phận hỗ trợ kỹ thuật riêng để giúp bạn.Quý khách có nhu cầu vui lòng liên hệ: 028-83360257 hoặc E-mail:
Tech@foregene.com.
Không chiết xuất axit nucleic hoặc năng suất axit nucleic thấp
Thông thường có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất thu hồi, chẳng hạn như: hàm lượng axit nucleic của mẫu, phương pháp vận hành, thể tích rửa giải, v.v.
Phân tích các nguyên nhân phổ biến:
1. Quá trình ly tâm trong bể nước đá hoặc nhiệt độ thấp (4°C) được thực hiện trong quy trình.
Gợi ý: Vận hành ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong toàn bộ quá trình, không ngâm nước đá và ly tâm ở nhiệt độ thấp.
2. Bảo quản mẫu không đúng cách hoặc bảo quản mẫu quá lâu.
Khuyến nghị: Bảo quản mẫu ở -80°C và tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần;cố gắng sử dụng các mẫu mới được thu thập để chiết xuất axit nucleic.
3. Ly giải mẫu không đủ.
Khuyến nghị: Vui lòng đảm bảo rằng mẫu và dung dịch làm việc ly giải được trộn kỹ và ủ ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong 10 phút.
4. Thêm dung dịch rửa giải không chính xác.
Gợi ý: Đảm bảo rằng ddH2O không có RNase được thêm từng giọt vào giữa màng cột tinh chế và không làm rơi nó trên vòng cột tinh chế.
5. Thể tích chính xác của ethanol tuyệt đối đã không được thêm vào Buffer RW2.
Gợi ý: Vui lòng làm theo hướng dẫn, thêm đúng lượng ethanol tuyệt đối vào Buffer RW2 và trộn đều trước khi sử dụng bộ kit.
6. Thể tích mẫu không phù hợp.
Gợi ý: 200µl mẫu được xử lý cho mỗi 500µl Buffer DRL.Quá trình xử lý mẫu quá mức sẽ dẫn đến năng suất chiết xuất axit nucleic thấp hơn.
7. Thể tích rửa giải không phù hợp hoặc rửa giải không đầy đủ.
Khuyến nghị: Thể tích rửa giải của cột tinh chế là 30-50μl;nếu hiệu quả rửa giải không đạt yêu cầu, nên kéo dài thời gian ở nhiệt độ phòng sau khi thêm ddH2O không chứa RNase đã được làm nóng trước, chẳng hạn như 5-10 phút.
8. Ethanol còn lại trên cột sau khi rửa bằng Buffer RW2.
Gợi ý: Nếu vẫn còn etanol sau khi ly tâm với Buffer RW2 trong 2 phút, cột có thể được đặt ở nhiệt độ phòng trong 5 phút sau khi ly tâm để loại bỏ hoàn toàn etanol còn sót lại.
Axit nucleic tinh khiết bị phân hủy
Chất lượng của axit nucleic tinh khiết có liên quan đến việc bảo quản mẫu, sự nhiễm bẩn RNase, hoạt động và các yếu tố khác.Phân tích các nguyên nhân phổ biến:
1. Các mẫu được lấy không được lưu trữ kịp thời.
Gợi ý: Nếu mẫu không được sử dụng kịp thời sau khi lấy, vui lòng bảo quản ngay ở -80°C ở nhiệt độ thấp.Để chiết xuất RNA, hãy cố gắng sử dụng các mẫu mới được thu thập.
2. Lấy mẫu và làm đông lạnh và rã đông nhiều lần.
Đề xuất: Tránh đông lạnh và rã đông (không quá một lần) trong quá trình lấy và bảo quản mẫu, nếu không sản lượng axit nucleic sẽ bị giảm.
3. RNase được đưa vào phòng phẫu thuật hoặc không đeo găng tay, khẩu trang, v.v. dùng một lần.
Khuyến nghị: Các thí nghiệm chiết xuất RNA được thực hiện tốt nhất trong phòng thao tác RNA riêng biệt và bàn thí nghiệm nên được làm sạch trước khi thí nghiệm.
Đeo găng tay và khẩu trang dùng một lần trong suốt quá trình thí nghiệm để tránh sự phân hủy RNA do đưa RNase vào mức độ lớn nhất.
4. Thuốc thử bị nhiễm RNase trong quá trình sử dụng.
Khuyến nghị: Thay thế bằng Bộ phân lập DNA/RNA của Vi-rút mới cho các thí nghiệm liên quan.
5. Các ống ly tâm và đầu pipet được sử dụng để thao tác RNA bị nhiễm RNase.
Đề xuất: Đảm bảo rằng các ống ly tâm, đầu pipet, pipet, v.v. được sử dụng để chiết xuất RNA đều không chứa RNase.
Axit nucleic tinh khiết ảnh hưởng đến các thí nghiệm xuôi dòng
DNA và RNA được tinh chế bằng cột tinh chế, nếu hàm lượng ion muối và protein quá cao sẽ ảnh hưởng đến các thí nghiệm tiếp theo, chẳng hạn như: khuếch đại PCR, sao chép ngược, v.v.
1. DNA và RNA rửa giải có dư các ion muối.
Gợi ý: Đảm bảo thêm đúng thể tích etanol tuyệt đối vào Bộ đệm RW2 và rửa cột tinh chế hai lần ở tốc độ ly tâm được chỉ định trong hướng dẫn vận hành;Thực hiện ly tâm để giảm thiểu ô nhiễm ion muối.
2. DNA và RNA rửa giải có dư lượng ethanol.
Đề xuất: Sau khi xác nhận việc rửa bằng Bộ đệm RW2, hãy thực hiện ly tâm ống rỗng ở tốc độ ly tâm trong hướng dẫn vận hành;nếu vẫn còn cặn ethanol, bạn có thể ly tâm ống rỗng rồi đặt ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để loại bỏ cặn ethanol ở mức tối đa.
Tài liệu chỉ dẫn:
Hướng dẫn sử dụng Kit phân lập DNA & RNA virus
