• Facebook
  • linkin
  • youtube

W: Anh ơi, phiên mã ngược đã hoàn thành, và cuối cùng là bước cuối cùng – PCR định lượng huỳnh quang!Anh ơi, real-time PCR định lượng là gì vậy anh?
M: PCR bạn luôn biết, phải không?
W: Bạn biết đấy, PCR là phản ứng chuỗi polymerase, và nó là một công nghệ làm tăng DNA!
M: Gần như là… Đó là một phương pháp kỹ thuật để khuếch đại trình tự mục tiêu lên hơn một triệu lần thông qua các đoạn mồi cụ thể, nhưng điều này chỉ cho biết sự hiện diện hay vắng mặt của trình tự mục tiêu và không thể xác định số lượng mẫu ban đầu.PCR định lượng huỳnh quang là một phương pháp kỹ thuật được phát triển để giải quyết vấn đề này.PCR thời gian thực và PCR số lượng (qPCR) thường đề cập đến nó.
W: Sự khác biệt so với PCR thông thường nằm ở định lượng huỳnh quang?
M:Có, nghĩa là, trong giai đoạn mở rộng của mỗi chu kỳ PCR, cường độ tín hiệu huỳnh quang được phát hiện và lượng mẫu ban đầu có thể được tính theo sự thay đổi của cường độ tín hiệu.
W: Cảm giác thật phức tạp!Tôi có phải tự tính toán điều này không?
M: Cái này chư vị phải học từ từ, hiểu nguyên lý là tốt nhất.Giờ đây, trước tiên bạn có thể tập trung vào giá trị CT, đây là dữ liệu thử nghiệm tương đối trực quan và kích thước của nó tương ứng với kích thước của số lượng mẫu ban đầu.Ngoài ra còn có các biểu đồ như đường cong khuếch đại và đường cong nóng chảy.Họ có tiếng nói cuối cùng về việc thử nghiệm của bạn có thành công hay không.
W: Ồ, anh trai.Sau đó, tôi sẽ thực hiện thí nghiệm qPCR!
M: Đặc biệt chú ý không thêm mẫu vào khu vực thuốc thử, nếu không hỗn hợp chưa sử dụng của bạn sẽ dễ bị nhiễm bẩn!
W: Hiểu rồi!

1

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Hiệu quả cao hơn, độ đặc hiệu cao hơn
Độ nhạy cao, khả năng tương thích tốt

2 3


Thời gian đăng bài: 22-07-2022